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目的 探讨从小鼠骨髓中获得树突状细胞(dendritic cells,DC)并在体外进行培养扩增，在DC的培养过程中加入小鼠H22肝癌细胞全细胞性抗原以致敏DC。用致敏的DC体外激活肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor-infiltrating lymphocyte,TIL)。观察致敏DC激活的TIL体外对小鼠H22肝癌细胞杀伤活性的作用。 方法 从小鼠腿骨中获得骨髓细胞，利用特异性的CD4、CD8a、CD45R单克隆抗体、补体缓冲液和DC的半粘附性，去除粒细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、NK细胞、单核细胞和巨噬细胞，再联用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte marcophage-colony stimulating factor,GM-CSF)和白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)体外培养，以获得大量高纯度的DC；在DC培养过程中加入小鼠H22肝癌细胞全细胞性抗原以致敏DC，然后用致敏DC激活TIL，进行体外小鼠H22肝癌细胞杀伤活性实验。体外小鼠H22肝癌细胞杀伤活性实验中A组为实验组，其效应细胞为DC激活的TIL；B组、C组和D组均为对照组，其效应细胞分别为未经DC激活的TIL、DC激活的小鼠脾淋巴细胞和未经DC激活的小鼠脾淋巴细胞，以上4组均以小鼠H22肝癌细胞为靶细胞，进行体外细胞杀伤活性检测。 结果 (1)可从每只小鼠骨髓细胞中获得(2～3)×10~6个DC，其纯度60％以上。(2)从每克肿瘤组织中可获得(3～8)×10~5个TIL，平均为6X 10’个nL；体外加人rhlL2进行nL培养扩增。11天后，TIL扩增倍数从3 0q0倍不等，平均约为60倍。3）末经DC激活的小鼠脾淋巴细胞山组）表现出很弱的体外杀伤小鼠H22肝癌细胞的作用，杀伤率为［汐．77上 l．39）O上 DC激活的小鼠脾淋巴细胞（C组）和未经DC激活的TIL旧组）均表现出较强的体外杀伤小鼠H22肝癌细胞的作用，杀伤率分别为K49．46土3．7）％抒［＊0．95士3刀2）％＊两者比较差异无显著性厂＞0刀5），但它们分别与未经＊C激活的小鼠脾淋巳细胞（D组）相比较，差异均有显著性瞩＜0刀1）Z＊C激活的＊（A组）表现出很强的体外杀伤小鼠H22肝癌细胞的作用，杀伤率为I（．52士3．88）川，与其他各组分别比较，差异均有显著性（P＜0刀1卜结论O）小鼠骨髓细胞用 GM（SF和 IL＊联合诱生培育，可获得大量高纯度的DC，所得细胞形态和功能符合DC特征。＊）可从荷瘤小鼠中获得TIL并能进行有效扩增。u）用小鼠H22肝癌细胞全细胞性抗原致敏的DC在体外能诱导TIL产生更高效而特异的杀伤小鼠H22肝癌细胞活性。