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金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是威胁人类的重要病原菌,是临床上常见的致病菌之一,它可黏附于医疗器械表面、人类组织器官表面形成生物膜,导致反复发作、难以彻底治愈的疾病,如慢性呼吸道感染、肺结核、前列腺炎等。目前临床上常用抗生素类药物治疗生物膜引起的感染,但由于耐药菌群的大量出现,迫切需要寻找一种新型高效的药物治疗生物膜引起的感染。本文对黄芩素抑制Staphylococcus aureus 26112生物膜形成的作用机制进行了研究,结果如下:(1)本文采用刚果红平板法及结晶紫半定量法筛选得到一株产膜菌株——Staphylococcus aureus 26112(SA26112),并测定了该菌株生物膜的形成过程,实验结果显示,培养3d的SA26112菌株能形成成熟的生物膜;(2)采用TTC法及平板法测定了黄芩素对SA26112菌株生物膜形成的抑制作用,实验结果显示,黄芩素能抑制SA26112菌株生物膜的形成,其MIC和MBC均为0.04mg/ml;(3)本文测定了黄芩素对SA26112菌株成熟生物膜的作用,结果显示,黄芩素能使成熟生物膜变薄,但不能完全杀死膜内的细菌;(4)采用TTC法测定了黄芩素与环丙沙星联用后对SA26112菌株成熟生物膜的作用,实验结果显示,当黄芩素浓度为0.12mg/ml、环丙沙星为16μg/ml时能完全杀死生物膜内的细菌;(5)通过Dot-blot法检测黄芩素对SA26112菌株PIA合成的影响,发现随着黄芩素浓度增加PIA合成量减少,当浓度为1MIC(0.04mg/ml)时可明显抑制PIA合成;(6)通过微量紫外分光光度计测定黄芩素对SA26112菌株e DNA释放量的影响,发现随着黄芩素浓度增加e DNA释放量逐渐降低,当黄芩素浓度达到1MIC(0.04mg/ml)时e DNA的释放量减少了97%(p<0.01);(7)通过RT-PCR技术测定黄芩素对SA26112菌株ica A及cid A基因表达量的影响,结果显示随着黄芩素浓度的增加基因的表达量降低,当浓度达到1MIC(0.04mg/ml)时,与对照组相比ica A及cid A基因的表达量均分别减少了62%和41%(p<0.01)。