论文部分内容阅读
侧脑室前下区(anteriorsubventrieularzone,SVZa)是大脑中神经干细胞数量较多的区域之一,该区域神经干细胞产生的成神经细胞是最具特色的细胞群,它们自产生起即具备发育成神经细胞的潜能,但在迁移至嗅球的过程中始终保持向神经细胞分化的潜能而不进一步分化,直到迁移至目的地后才分化为成熟的神经细胞,因此,SVZa成神经细胞是研究神经细胞发育及迁移的较佳模型。肌球蛋白X(MyosinX)是脊椎动物所特有的细胞骨架蛋白,在脑、肾、肝等大多数组织中都有表达,它的显著特点是定位于细胞丝足的顶端和片状伪足的边缘,MyosinX作为一个动力蛋白分子,起到连接细胞膜蛋白与细胞内骨架蛋白的桥梁作用,推测它可能在SVZa成神经细胞的迁移过程中起到重要作用。
通过对新生大鼠脑切片进行免疫组化,观察SVZa及其成神经细胞迁移至嗅球的喙状迁移流区域(rostralmigratorystream,RMS)MyosinX的表达与分布,在获得MyosinX在RMS区域高表达的基础上,建立新生大鼠嗅球RMS区域外植体培养体系,通过Matrigel和Collagen不同比例的胶原混合物,优化外植体培养条件。进一步,分离RMS区域的成神经细胞,利用构建的GFP融合表达载体MyosinX—siRNA和scramblesiRVA转染分离后的成神经细胞,悬滴法培养成团,模拟体外外植体包埋培养,24小时后,表达scramblesiRNA的成神经细胞大量从细胞团中迁移出来,而表达MyosinX—siRNA的成神经细胞迁移的数量明显减少,细胞迁移的距离也明显缩短,与同一细胞团中未被转染的成神经细胞和表达scramblesiRNA的成神经细胞相比差异显著,上述结果表明:减低内源性MyosinX表达抑制成神经细胞迁移,MyosinX在SVZa成神经细胞的迁移中起着重要的作用。