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目的:分析转录因子GATA3对小鼠ORMDL3基因转录的影响机制,探索重组法国梧桐花粉过敏原rPla a2对小鼠ORMDL3基因转录表达的影响及相关机制,为植物吸入性过敏原所致过敏性哮喘的防治寻找新的靶点提供思路。方法:(1)染色质免疫沉淀、RNA干扰、转录因子过表达、双荧光素酶活性分析等实验,鉴定GATA3与小鼠ORMD3启动子结合和启动子活性的调控作用;(2)通过实时定量PCR和Western Blot实验,观察GATA3对小鼠ORMDL3表达水平的影响;(3)利用法国梧桐花粉重组过敏原rPla a2探索对小鼠ORMDL3启动子活性、mRNA及蛋白表达的影响,用ChIP-qPCR观察rPla a2刺激后GATA3与小鼠ORMDL3启动子区结合的影响。结果:(1)ChIP实验表明GATA3与小鼠ORMDL3核心启动子-74bp至+141 bp结合,但不能与小鼠ORMD3基因转录起始位点上游-921至-835 bp序列结合。(2)RNA干扰、转录因子过表达、实时荧光定量PCR、Western Blot实验证明GATA3能正向调控ORMDL3的表达。(3)rPla a2上调小鼠ORMDL3启动子活性,突变GATA3和STAT6结合序列后该上调作用受抑制,rPla a2促进ORMDL3和GATA3表达,干扰GATA3表达可抑制rPla a2对ORMDL3的上调作用。ChIP-qPCR实验发现rPlaa2增强GATA3与ORMDL3启动子区的结合。结论:(1)GATA3通过直接结合小鼠ORMDL3核心启动子区域正向调控ORMDL3基因表达,为以GATA3为靶点的哮喘治疗提供理论依据。(2)rPla a2通过上调内源性GATA3表达和增强GATA3与核心启动子区域的结合上调ORMDL3表达,为植物过敏原诱发的过敏性哮喘治疗提供新的思路。