IFN-α2b及IL-2对不同膀胱癌细胞株生长及HLA-DR抗原表达影响的实验研究

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目的:探讨膀胱移行细胞癌细胞株5637、T24细胞表面抗原HLA-DR的表达与肿瘤病理分级之间的关系,并分析IFN-α2b及IL-2对肿瘤细胞增殖及HLA-DR表达的影响,以初步揭示膀胱移行细胞癌发生、发展的分子机制。材料与方法:应用MTT法,在96孔板细胞培养环境中加入不同浓度的IFN-α2b和IL-2,分别在24h、48h及72h时间点检测各浓度组肿瘤细胞的吸光度(OD值),计算并比较不同浓度IFN-α2b及IL-2在各时间点对肿瘤细胞的抑制率;应用免疫组织化学方法(生物素检测法,SP-9000)检测两种膀胱移行细胞癌细胞株5637、T24 HLA-DR抗原的表达,分析相同浓度的IFN-α2b、IL-2和IFN-α2b+IL-2刺激后HLA-DR在两种膀胱癌细胞株中的积分光密度(Integrated optical density,IOD)值,以比较IFN-α2b及IL-2对肿瘤细胞HLA-DR表达的影响。结果:1.加入不同浓度IFN-α2b后,膀胱移行细胞癌细胞株5637生长明显受抑制,在各个时间点上不同浓度组间的OD值间有显著性差异(p<0.05),1000U/ml组、5000U/ml组OD值均高于10000U/ml组,而1000U/ml组与5000U/ml组OD值间无显著性差异;加入不同浓度IL-2后,细胞癌株生长抑制不明显,甚至出现负值,在各个时间点上不同浓度组OD值之间均无显著性差异(p>0.05);加入相同浓度的IFN-α2b和IL-2后,IFN-α2b对肿瘤细胞的抑制率明显高于IL-2,在各个时间点上IFN-α2b组肿瘤细胞的OD值均低于IL-2组,两者之间有统计学差异(p<0.05)。2.IFN-α2b或IL-2刺激之前,膀胱移行细胞癌细胞株5637、T24两种细胞株中很少甚至无HLA-DR表达;刺激之后,两种细胞株的HLA-DR的表达(IOD值)均有所增强。三种处理组间IOD值存在统计学差异,IFN-α2b组及IFN-α2b+IL-2组的IOD值均显著高于于IL-2组(p<0.01),而IFN-α2b组与IFN-α2b+IL-2组之间无显著差别(p>0.05)。结论:HLA-DR的表达与膀胱癌的病理分级无关,所以不能作为提示预后的指标;IFN-α2b可诱导膀胱癌细胞的凋亡,对肿瘤细胞有直接杀伤能力,且呈浓度依赖性,而IL-2却不能抑制肿瘤细胞生长;IFN-α2b可上调膀胱癌细胞HLA-DR的表达,IL-2对膀胱肿瘤细胞株HLA-DR的表达无明显作用,且IL-2对IFN-α2b的增强HLA-DR表达作用无影响。
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