钙对染铅大鼠骨骼损伤干预机制的研究

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[目的]研究钙对染铅大鼠骨骼损伤的影响,分别从细胞水平和分子水平探讨其干预机制,为适量补钙预防铅中毒提供理论依据。[方法]选用(50土5)g的健康雄性SD大鼠60只,适应性喂养7d后,随机分为五组:对照组(基础饲料,去离子水)、染铅组(基础饲料,0.2%醋酸铅水)、试验Ⅰ组(基础饲料添加0.5%碳酸钙,0.2%醋酸铅水)、试验Ⅱ组(基础饲料添加1.0%碳酸钙,0.2%醋酸铅水)、试验Ⅲ组(基础饲料添加2.0%碳酸钙,0.2%醋酸铅水)。饲养60d后,称重;眼球取血测定血清中骨钙素(BGP)、甲状旁腺激素(PTH)的含量和碱性磷酸酶(AKP)的活性;取大鼠后肢股骨,ICP法测定股骨中Pb、Ca、Zn、Cu、Mg、Fe、Mn的含量;通过HE染色观察骨组织细胞形态的变化;采用Trizol提取骨骼中总RNA,应用荧光定量RT-PCR法测定TRPV5、TRPV6、NCX1和PMCA1b基因的mRNA表达量。[结果](1)与对照组比较,染铅组体重下降,从第17天起,差异达极显著水平(P<0.01);与染铅组比较,从第21天起试验Ⅱ组差异达极显著水平(P<0.01),试验Ⅲ组体重下降,在第41天时差异达显著水平(P<0.05)。与对照组比较,染铅组血清BGP含量和AKP活力显著降低(P<0.05或P<0.01),PHT含量极显著升高(P<0.01);与染铅组比较,三个试验组BGP含量和AKP活力均有所上升,试验Ⅰ组AKP差异显著(P<0.05),试验Ⅱ组BGP和AKP差异显著(P<0.05);三个试验组PHT含量均下降,试验Ⅱ组差异极显著(P<0.01)。(2)与对照组比较,染铅组骨骼中铅的含量升高,差异极显著(P<0.01),而钙、锌、铜和铁的含量下降,差异达显著或极显著水平(P<0.05或P<0.0.1),镁和锰的含量略有下降,差异不显著;与染铅组比较,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组骨骼中铅含量极显著降低(P<0.01),试验Ⅱ组中钙、铜含量显著升高(P<0.05),试验Ⅲ组钙水平极显著升高(P<0.01)。(3)与对照组比较,染铅组骨髓腔显著增大,骨小梁明显变稀疏,分布不均,萎缩不光滑,有些区域骨小梁甚至消失,且骨小梁外周有形态各异的吸收凹陷,骨组织中成骨细胞水平锐减,破骨细胞水平上升;与染铅组相比,试验组骨细胞髓腔缩小,骨小梁数目增加,变得光滑,破骨细胞数量也有所下降,其中试验Ⅱ组修复效果较好。(4)与对照组比较,染铅组TRPV5和TRPV6 mRNA表达量极其显著下降(P<0.01),而NCX1和PMCA1b mRNA表达量极显著上升(P<0.01);与染铅组比较,试验Ⅰ组TRPV5和TRPV6 mRNA表达量显著上升(P<0.05),而NCX1 mRNA表达量显著下降(P<0.05),试验Ⅱ组TRPV5和TRPV6 mRNA表达量极显著上升(P<0.01),而NCX1 和 PMCAlb mRNA表达量显著下降(P<0.01或P<0.05),试验Ⅲ组TRPV6 mRNA表达量显著上升(P<0.05),而 NCX1 mRNA表达量显著下降(P<0.05)。[结论]一定剂量的钙可调节染铅大鼠骨代谢相关指标,干预铅暴露对骨组织的损伤,调控骨组织TRPV通路中TRPV5、TRPV6、NCX1、PMCAlb基因的mRNA表达量。可见,适当剂量的钙的补充对染铅动物骨质损伤有一定的缓解作用。
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