【摘 要】
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本文利用胶体金标记快速检测技术,开展了氰戊菊酯农药残留快速检测方法研究。通过优化各项试验参数,以氰戊菊酯农药与包被在硝酸纤维素膜上的氰戊菊酯人工合成抗原竞争结合胶
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本文利用胶体金标记快速检测技术,开展了氰戊菊酯农药残留快速检测方法研究。通过优化各项试验参数,以氰戊菊酯农药与包被在硝酸纤维素膜上的氰戊菊酯人工合成抗原竞争结合胶体金标记的氰戊菊酯单克隆抗体,通过胶体金显色条带的颜色深浅来区分氰戊菊酯农药的残留量,达到快速检测样品中氰戊菊酯残留的目的,试验建立氰戊菊酯残留胶体金免疫层析技术,研发出胶体金免疫试纸条。采用柠檬酸三钠还原法,制备出粒直径为10nm的胶体金,以制备的胶体金作为标记物标记氰戊菊酯单克隆抗体,试验选择出最佳标记的pH值为6.0,最佳标记量为1mL胶体金标记氰戊菊酯单克隆抗体为22μg。选用Millipore 135的NC膜作为固相载体,将氰戊菊酯人工抗原包被在检测线(T线)处,兔抗鼠IgG多克隆抗体包被在质控线(C线)处。快速检测试纸条100%抑制浓度为250ng/mL(检测线为无色)。试验研究了几种氰戊菊酯的结构类似物对试纸条快速检测的干扰。试验结果表明:氯氰菊酯、胺菊酯、联苯菊酯、溴氰菊酯、氯菊酯对所研制的试纸条都没有交叉反应。稳定性试验证明了所制备的试纸条在4摄氏度条件下2年内可保持检测结果的可靠性。以甲醇为提取溶解,对油菜、菜薹、小白菜、青椒等样品进行了添加回收试验,并通过高效气相色谱测定方法验证了试纸条检测方法的有效性。结果表明该方法的回收率为84%-98%,变异系数均小于10%,可用于实际样品中氰戊菊酯残留的快速检测。该试纸条检测方法无需特殊的检测仪器、操作简单、价格便宜、试验结果易于识别,在10--15min内即可得出检测结果。试纸条的稳定性较高,可以作为农产品中氰戊菊酯残留现场大量初步筛选的有效手段,也可以为其它有毒农药残留检测试纸条的制备提供借鉴。
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