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目的:多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome, PCOS)是一个育龄妇女常见的内分泌性疾病,发病率约为5%~10%。临床特征为月经不规律、卵泡闭锁、持续不排卵以及稀发排卵,并且常常伴随高的自发流产率.其发生机制仍旧不太明确,是当前大家研究的难点和热点。多数研究认为PCOS是代谢与内分泌紊乱的疾病,涉及内分泌、代谢、免疫、家族性遗传等诸多因素。而近年来越来越多的研究显示,基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶-9(matrix metallo- proteinases-2、9 ,MMP-2、MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制因子-1(tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 ,TIMP-1)在多囊卵巢综合征的发病机制中起到极其重要的作用。本研究通过测定在我院接受体外受精与胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer, IVF-ET)治疗的多囊卵巢综合征患者和月经正常因其它原因实施此项手术妇女卵泡液里的基质金属蛋白酶-2、9(MMP-2、MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)的水平,探讨PCOS患者卵泡闭锁及高自发流产率的病因,从而为临床治疗提供理论基础。方法1研究对象1.1 PCOS组(即实验组):选择2006年1月-2006年8月在河北医科大学第二医院生殖中心接受IVF-ET治疗的多囊卵巢综合征患者20例,平均年龄在29.7±5.1岁。1.2对照组:随机选择同期在本生殖中心接受IVF-ET治疗的不孕妇女20例,为月经正常的患者,不孕原因为输卵管因素,且基础血(月经第三天)FSH、LH、E2、PRL、T在正常范围内,平均年龄在31±5.52岁。PCOS组和对照组的患者均为初次进入周期,均行控制超促排卵(COH)治疗,COH长方案:采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a/Decapeptyl)、重组卵泡刺激素(Gonal-F)、人绝经期促性腺激素(HMG)及人绒毛膜促性腺激素(HCG)超促排卵治疗。2测定内容及方法2.1标本采集:根据阴道B超和尿LH试纸半定量及激素LH、E2水平监测卵泡发育。当B超显示下有一个卵泡直径≥18mm,两个卵泡直径≥17mm,或者三个卵泡直径≥16mm时,于当日21:00给予肌肉注射HCG5000-10000iu ,36小时后在阴道超声引导下取卵。取卵日,经阴道B超测量各个卵泡直径,术中仅留取直径≥16mm无血染卵泡液,PCOS患者的同一周期的卵泡液收集在一起,集中离心(2000转/5分钟,室温),取上清液置-20℃保存待测。测定卵泡液中MMP-2、9,TIMP-1的水平。以同法留取对照组卵泡液,离心后保存待测。2.2标本测定:运用ELISA方法测定卵泡液中MMP-2和MMP-9,TIMP-1的水平.2.3内分泌激素测定(1)取PCOS组和对照组月经第3天时的空腹静脉血,用微粒子化学发光法测定血清中:FSH、E2、LH、T、PRL的水平。(2)取PCOS组和对照组HCG日的静脉血测血清中:E2、LH的水平。结果1 PCOS组和对照组内分泌激素比较.1.1月经第3天基础血FSH、E2、LH、T、PRL测定结果比较。1.1.1 PCOS组FSH均值为(5.34±0.72mIU/ml)对照组FSH均值为(7.12±1.35mIU/ml),比较无明显差异性,无统计学意义(P>0.05)1.1.2 PCOS组E2均值为(20.59±3.41pg/ml),对照组E2均值为(32.09±2.67pg/ml),比较无明显差异性,无统计学意义(P>0.05)。1.1.3 PCOS组PRL均值为(13.44±1.79ng/ml)、对照组PRL均值为(14.27±2.16ng/ml),比较无明显差异性,无统计学意义(P>0.05)。1.1.4 PCOS组T均值为(0.72±0.11nmol/ml)对照组T均值为(0.34±0.08nmol/ml), PCOS组高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。1.1.5 PCOS组LH均值为(10.89±0.96mIU/ml)对照组LH均值为(4.68±0.19mIU/ml), PCOS组高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。1.1.6 PCOS组LH/FSH比值为2~3,对照组LH/FSH为0.8~1.1,PCOS组高与对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。1.2 HCG日LH、E2测定结果比较1.2.1 PCOS组LH均值为(10.89±2.31mIU/ml)对照组LH均值为(8.76±1.74 mIU/ml),比较无明显差异性,无统计学意义(P>0.05)1.2.2 PCOS组E2均值为(1121.1±119.04pg/ml )对照组E2均值为(1062±121.4pg/ml)比较无明显差异性,无统计学意义(P>0.05)2 PCOS组和对照组间卵泡液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的结果比较2.1 MMP-2比较:PCOS组卵泡液中MMP-2均值(52.886±2.9069ng/ml)较对照组卵泡液中MMP-2均值(39.805±0.8587ng/ml)增高,认为两组之间比较有统计学意义(P<0.05)。2.2 MMP-9比较: PCOS组卵泡液中MMP-9均值(47.200±1.4277ng/ml)较对照组卵泡液中MMP-9均值(37.107±0.7330ng/ml)增高,认为两组之间比较有统计学意义(P<0.05)。2.3 TIMP-1比较:PCOS组卵泡液中TIMP-1均值为(37.720±0.3748ng/ml)较对照组卵泡液中TIMP-1均值(40.942±0.4705ng/ml)降低,认为两组之间比较有统计学意义(P<0.05)。3各指标之间的直线相关关系3.1 MMP-2的表达同TIMP-1的表达呈负相关;3.2 MMP-2的表达同MMP-9的表达呈正相关;3.3 MMP-9的表达与TIMP-1的表达呈负相关;4妊娠组妇女(16名)与未妊娠组妇女(24名)卵泡液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的比较4.1 MMP-2的比较:妊娠组(16名)妇女的卵泡液中MMP-2均值为(42.130±0.4417ng/ml)非妊娠妇女组(24名)卵泡液中MMP-2均值为(41.336±0.9201ng/ml),没有有显著差异性,认为两组之间无统计学意义(P>0.05)。4.2 MMP-9的比较:妊娠组(16名)妇女的卵泡液中MMP-9均值为(43.357±0.5762ng/ml )非妊娠妇女组(24名)卵泡液中MMP-9均值为(41.879±0.8276ng/ml),没有显著差异性,认为两组之间无统计学意义(P>0.05)。4.3 TIMP-1的比较:妊娠组(16名)妇女的卵泡液中TIMP-1均值为(38.572±0.6753ng/ml )非妊娠妇女组(24名)卵泡液中TIMP-1均值为(38.796±0.7627ng/ml),没有显著差异性,认为两组之间无统计学意义(P>0.05)。结论1 PCOS组内分泌基础血LH、T、LH/FSH比值水平均高于对照组,而FSH、PRL、E2无明显差异性,而HCG日PCOS组和对照组血LH、E2无明显差异性,没有统计学意义。2在相同的条件下,PCOS患者卵泡液中的MMP-2、MMP-9的水平明显高于对照组,而PCOS患者卵泡液中TIMP-1的水平低于于对照组。提示:MMP-2、9在多囊卵巢综合征患者中的水平增高,TIMP-1水平降低,由此我们可以推断其与PCOS患者卵泡过早闭锁及高自发流产率相关,这个结论对PCOS患者怀孕后适当的补充孕激素可以减少自发流产率提供了理论基础。3 MMP-2、MMP-9的表达同TIMP-1的表达呈负相关,MMP-2表达同MMP-9呈正相关。4在妊娠组和非妊娠组的卵泡液中MMP-2、MMP-9、TIMP-1的水平无明显差异性,没有统计学意义。