【摘 要】
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目的:脂肪干细胞由于具有多能性,可诱导分化能力,成为再生医学替代性治疗的一个重要干细胞来源。本研究分析了从大网膜、胃底和皮下来源的脂肪组织中提取脂肪干细胞的方法及
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目的:脂肪干细胞由于具有多能性,可诱导分化能力,成为再生医学替代性治疗的一个重要干细胞来源。本研究分析了从大网膜、胃底和皮下来源的脂肪组织中提取脂肪干细胞的方法及培养条件,研究分析三种来源的脂肪干细胞的特点,从而获得脂肪干细胞的最佳来源及最佳的培养条件以利于后续基础研究及临床实际应用等。本研究还进一步对脂肪干细胞向β细胞定向分化进行了初步探索。方法:(1)利用不同的I型胶原酶浓度,胶原酶消化时间等探究不同部位脂肪干细胞的提取最适条件;(2)利用三种不同培养体系(体系一、二和三)培养不同部位的脂肪干细胞,并分别对它们进行成骨、成脂和成软骨分化诱导,同时对它们进行流式细胞术鉴定其细胞表面标记物,找到其最适培养条件并鉴定其分化能力及纯度;(3)对有差异的脂肪干细胞进行流式分选,q PCR进一步鉴定提取的细胞种类;(4)利用化学方法对脂肪干细胞向β细胞的定向分化诱导,q PCR检测分化的各个时段的细胞变化。结果:(1)不同部位的提取的脂肪干细胞有不用的提取方法和培养条件。培养体系一的最适合培养不同来源ASCs。(2)在分化能力的比较上,皮下来源的脂肪干细胞的分化能力最好。(3)皮下来源的脂肪干细胞纯度高,大网膜来源的脂肪干细胞混杂着外皮细胞和血管内皮细胞。(4)脂肪干细胞向β细胞的诱导尚需进一步优化。结论:对脂肪干细胞来说,三个培养体系中一是最适的培养条件,皮下来源的脂肪干细胞分化能力最好,纯度也最高。脂肪干细胞向β细胞的定向分化还需要再探索完善,以达到最理想效率。
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