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植物病毒病素有“植物癌症”之称,严重制约着我国粮食生产安全。由昆虫传播的水稻病毒病是农业生产上的主要病毒病害,一些水稻病毒不但可以侵染水稻,还可以侵染玉米,小麦等重要粮食作物,给我国农业生产带来了极大的安全隐患并造成重大的经济损失。由于水稻病毒病尚无有效的防治手段,病害一旦流行其损失无法挽回。在我国南方水稻产区,水稻齿叶矮缩病毒(Rice ragged stunt virus,RRSV)、水稻草状矮化病毒(Rice grassy stunt virus,RGSV)和南方黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)等是引起常见水稻病毒病害的主要病原,给我国水稻生产带来了巨大的损失。由Small RNA介导的RNA沉默(RNA silencing)是植物抵抗病毒侵染的一种普遍机制。在RNA沉默过程中DCL和AGO蛋白是发挥抗病毒功能的核心原件。水稻编码5个DCL蛋白和19个AGO蛋白,然而蛋白在水稻抗病毒过程的作用还不完全清楚。最新的报告显示水稻被病毒侵染后会显著诱导某些AGO蛋白的高表达,其中包括AGO1蛋白和单子叶植物特有的AG018蛋白,深入研究发现被病毒特异诱导的AGO18蛋白能够通过结合并抑制miR168的功能,从而保护AGO1,进而增强植物抗病毒防御反应。在AGO18所结合的miRNA中还包含miR528和miR159等,未发表的数据显示mir528突变体表现对水稻条纹病毒的高度抗性。最新的研究揭示RDR可以通过调控病毒来源的vsiRNA和病毒激活的vasiRNA参与植物抗病毒过程。因此,防治病毒病最为经济有效而又环保的方法就是挖掘抗病毒基因培育抗病品种。本文主要依据水稻RNA沉默路径中重要的抗病毒原件(AGO18,RDR1和miR528)作为抗病毒Marker基因,采用Real-time PCR方法检测近100种不同遗传背景的水稻品系或品种中抗病毒Marker基因的表达差异,然后通过后期人工接种水稻病毒(RRSV)统计水稻的发病率及病毒外壳蛋白在水稻内的相对表达量进一步验证,以期获得基因与抗病表型相关联的水稻抗病毒品种。Real-time PCR方法检测抗病毒Marker基因结果显示:3个基因在不同水稻品种的相对表达量差异很大;本文根据OsRDR1、OsAGO18基因高相对表达量和miR528低相对表达量的原则筛选出18个水稻品种作为潜在的抗病毒品种。生物学传毒结果显示:比较各水稻品种的发病率和病毒CP在水稻各品种中的相对表达量与三个目标基因的相对表达量之间的对应关系即:当OsRDR1、OsAGO18基因相对表达量越高和miR528相对表达量越低时水稻的发病率越低和RRSV外壳蛋白基因在水稻内的相对表达量越低。符合这一条件的水稻品种是P28、P26、P23。但各水稻品种的发病率和病毒CP在水稻各品种中的相对表达量之间没有明显的关系。可能是因为病毒粒子在水稻内积累到一定的阈值后,水稻才能表现出一定的病症。不同水稻品种有不同的阈值,也可能是因为这些水稻品种中有着其它的抗病毒过程。