杜仲叶提取物对MC3T3-E1细胞体外作用及其机制的实验研究

被引量 : 0次 | 上传用户:hahaha123789
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景:颌骨可因外伤、肿瘤、炎症等多种因素而造成骨缺损,颌骨缺损除直接导致颜面畸形外,还可引起严重的功能障碍,给病人造成语言、吞咽等功能的障碍,及在生理、心理、社会等方面的不良影响。自1912年Macewen报道利用自体肋骨修复下颌骨缺损获得成功以来,各国学者在颌骨缺损重建方面进行了大量的研究。颌骨缺损传统的治疗方法主要是骨移植,其中包括自体骨移植、异体、异种骨移植和人工骨代用品。近年来,随着生物学和材料科学的发展,组织工程学作为高新技术新领域的一门多学科交叉的新兴边缘学科随之应运而生,并得到了迅速的发展,利用组织工程学方法构建的组织工程骨已成为骨移植的又一研究热点。杜仲,为杜仲科植物杜仲(Eucommia ulmoids Oliv.)的干燥树皮,是我国特有的名贵中药,中国药典规定其树皮作为中药杜仲入药。杜仲皮一般需生长15-20年,而叶的资源相对丰富易得,研究证实杜仲叶与皮的化学成分基本一致,具有同等功效,可以以叶代皮,具有补肝肾、强筋骨等作用。杜仲叶的化学成分为:1)苯丙素类化合物:包括谷甾醇(13-sistosterol)、熊果酸(ursolic acid)、绿原酸(chlorogenic acid)。2)环烯醚萜类:杜仲醇(eneommiol)、京尼平苷酸(geniposidic acid)、京尼平苷(geniposide)、桃叶珊瑚苷(aucubin)。3)黄酮类:山奈酚(kaempferol)、斟皮素(quercetin)。研究表明,杜仲叶提取物的有效成分对成骨细胞的增殖具有明显的促进作用。机体在外伤等应激条件下都会由超氧化物歧化酶(SOD)、氧化酶等催化产生活性氧(reactive oxygenspecies,ROS),如超氧阴离子((O2)、过氧化氢(H2O2)、羟基自由基(HO·)等。这对于细胞信号传递、吞噬细胞的功能及创口愈合的快慢都有重要的作用。目的探讨不同浓度的杜仲叶提取物对体外培养的成骨细胞增殖作用的影响,并根据其体外活性测试的结果,选择杜仲叶提取物最佳成骨作用浓度;探讨杜仲叶提取物(Euec)对H2O2诱导所致的成骨细胞凋亡的抑制作用及其分子机制。方法:通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法进行细胞毒性实验,流式细胞计数法进行细胞增殖实验,以探讨杜仲叶的成骨作用;以H2O2诱导小鼠成骨样细胞(MC3T3-E1)氧化损伤,建立细胞凋亡模型,经适当浓度Euec的干预,采用Western blot,RT-PCR方法测定细胞的存活率,细胞的凋亡率,半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、-6、-7、-9的相关凋亡蛋白及基因表达。探讨Euec对H2O2所致MC3T3-E1凋亡的抑制作用及其可能的机制。结果:由实验可知:800umol/L的H2O2可致使MC3T3-E1细胞凋亡;杜仲叶提取物(Euec)(6.25ug/ml)可显著抑制H2O2所致细胞的氧化损伤,提高细胞的存活率;可明显降低细胞中凋亡细胞百分比;可抑制半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶Caspase-3、Caspase-6、Caspase-7、Caspase-9的蛋白和基因表达。结论:Euec对MC3T3-E1的增殖有促进作用,可以用于骨缺损修复;Euec能明显抑制H2O2诱导的MC3T3-E1细胞的凋亡作用,减轻MC3T3-E1细胞的氧化损伤,其机制可能与抑制Caspase-3、-6、-7、-9的激活有关。
其他文献
目的以浙江省社区卫生服务机构患者为对象,研究其对基本药物制度实施的满意度及影响因素。方法采用自行设计的调查问卷,于2013年7月上旬分别对绍兴市和丽水市的6所社区卫生服
目的研究及时接种乙肝疫苗首针与完成乙肝疫苗、百白破疫苗和麻疹疫苗全程免疫的关系。方法利用2006年全国乙肝血清流调福建省资料,采用χ2检验比较组间各因素差异,logistic
目的合成抗癌药neratinib。方法以2-氯-4-硝基苯酚和2-氯甲基吡啶为起始原料,经醚化、硝基还原得到3-氯-4-(吡啶-2-甲氧基)苯胺,3-氯-4-(吡啶-2-甲氧基)苯胺与3-氰基-6-乙酰
目的:观察微量元素与老年慢性肺心病的关系。方法:采用原子吸收分光光度计法对老年肺心病患者血清中微量元素(锌、铁、钙、镁、铜)测定,并与对照组(健康者)比较。结果:老年慢
目前国内对于转售价格维持案件的处理在立法和经济学逻辑上均备受争议。本文介绍了转售价格维持的国内立法和案例现状,并且从企业实施转售价格维持的动机、转售价格维持对市
目的:研究香菇多糖对小鼠T淋巴细胞膜上离子通道基因表达的影响。方法:40只KM小鼠随机分为对照(等容生理盐水)组与香菇多糖高、中、低剂量(12.5、2.5、0.5 mg/kg)组,腹腔注射
在共犯类型的划分上,正犯是共犯理论中的一个重要范畴,而共同正犯在具有正犯性的同时,又具有共同性的体现,问题更为复杂。对共同正犯的相关问题加深厘清,实有必要。本文共分四个部
目的:了解某院门诊降糖药的应用情况,为临床合理用药提供参考。方法:采用限定日剂量方法对该院2010-2012年降糖药的销售金额、品种、用药频度(DDDs)等进行分析。结果:降糖药
从5个属73株菌中筛选到一株柑桔溃疡黄单孢菌X034,它可将苯甘氨酸甲酯和7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(7-ADCA)缩合生成头孢氨苄。进一步考察了碳源、氮源、无机离子对产酶活性的影响,对酶反应条件进