H2S对尿源性脓毒血症凝血功能的影响及其肾功能的保护作用

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目的:建立兔尿源性脓毒血症模型,研究模型中凝血功能的变化及硫氢化钠(NAHS)对凝血功能的影响,探讨尿源性脓毒血症中的H2S的保护作用,为H2S应用于尿源性脓毒血症的治疗提供理论依据。方法:选取健康雄性新西兰大白兔30只,体重2.0-2.2kg,按照随机对照原则平均分为3组,每组10只。sham(假手术)组:家兔剖腹后,仅游离左测中段侧输尿管。sepsis(尿源性脓毒血症)组:游离并结扎家兔左测中段侧输尿管,向结扎点近端输尿管管腔内输注大肠埃希菌菌液(0.5ml/Kg),结扎注射点近端。HS-Se(硫氢化钠+尿源性脓毒血症)组:手术操作同Sepsis组,术后经耳缘静脉按照8.4μmol/kg的剂量注射浓度为50mmol/L的NaHS溶液。各组分别于术前、术后24 h、48 h和72 h采耳缘静脉血测定血小板计数、血浆抗凝血酶Ⅲ活性(ATⅢ:A)、纤溶酶原活性(PLG:A)、凝血VⅢ因子活性(FVⅢ:C)、血管性血友病因子(vWF)活性、PAR-1的表达水平、病理切片及肾功能等。得到数据后使用SPSS19.0软件对数据进行处理与分析。结果:1.sham组术后状态可,皮肤黏膜未见出血点。sepsis组术后精神萎靡,毛色不光滑,呼吸急促,饮水少,拒进食,对外界刺激反应迟钝;72h时7例发生寒战,2例下腹壁皮肤可见细小出血点。HS-Se组术后精神欠佳,毛色欠光滑,呼吸稍促,无寒战及皮肤黏膜出血发生,进食及饮水尚可,对外界刺激反应灵敏。2.血小板:sepsis组术后24 h、48 h和72 h与sham组比较,显著增高(P<0.05);术后48h、72h时显著高于HS-Se组(P<0.05)。HS-Se组术后24 h、48 h和72h较sham组明显升高(P<0.05)。3.抗凝血酶活性(ATⅢ:A):sepsis组术后24 h、48 h和72 h较sham组显著降低(P<0.05);术后48h显著低于HS-Se组(P<0.05)。HS-Se组术后48h及72h时和sham组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。4.纤溶酶原活性(PLG:A):sham组、HS-Se组术后24 h、48 h和72 h分别与术前相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。sepsis组术后72h显著低于其他各组(P<0.05)。5.血管性血友病因子(vWF):sepsis组术后组间比较均显著高于sham组、HS-Se组(P<0.05)。6.蛋白酶活化受体(PAR-1):sham组组内比较比较无显著性差异(P>0.05)。sepsis组术后和sham组比较,显著增高(P<0.05);和HS-Se组相比较,48h、72h时,sepsis组均显著高于HS-Se组(P<0.05)。HS-Se组术后24h较术前显著增高。7.各组术前肾功能(BUN、Cr)比较均无显著差异(P>0.05)。sepsis组术后术后72h和其余2组比较,显著增高(P<0.05)。8.肾组织HE染色后,sham组肾脏组织形态未见明显异常。sepsis组可见广泛的肾小管上皮变性,大片化脓性改变,大量中性粒细胞浸润,管型形成而HS-Se组可见肾小管上皮水肿、变性,部分区域未见明显化脓性改变,可见小部分炎性细胞浸润。结论:1.尿源性脓毒血症可导致凝血功能一系列变化:血小板计数短期内增高、vWF及PAR-1表达增高、ATⅢ:A及PLG:A下降;2.H2S可抑制尿源性脓毒症中的血小板的升高趋势、抑制vWF、PAR-1的活性表达,同时硫化氢可减轻尿源性脓毒血症中AT-III:A及PLG:A的消耗以稳定凝血系统的动态平衡;3.H2S对脓毒血症对肾功能产生的影响具有保护作用,是否与减少肾脏微血栓形成有关尚需进一步明确。
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