红景天苷对间充质干细胞促增殖及抗凋亡机制研究

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目的探讨红景天苷(salidroside)对体外培养的人骨髓间充质干细胞(Human bone mesenchymal stem cells hBMSCs)增殖的影响,以及对阿糖胞苷(Ara-c)诱导的人骨髓间充质干细胞凋亡的影响及其可能的作用机制。方法体外培养hBMSCs;流式细胞术鉴定免疫表型;体外向成骨、成脂诱导分化,特异性染色鉴定分化能力;MTT法检测不同浓度阿糖胞苷、红景天苷对hBMSCs增殖的影响;ELISA法检测红景天苷作用48h后hBMSCs中干细胞因子(SCF)的表达情况;流式细胞术检测细胞周期及凋亡情况;Hoechest33258检测骨髓间充质干细胞凋亡的细胞核形态学改变;RT-qPCR法检测SCF、BCL-2、BAX mRNA表达。结果体外成功分离培养的hBMSCs,形态多为长梭型、多边形;流式细胞仪分析细胞表达CD44、CD29和HLA-ABC,不表达CD34、CD45和HLA-DR;成骨、成脂诱导21d,茜素红染色可见钙化结节,油红O染色有质滴出现;与对照组比较,红景天苷具有促进hBMSCs增殖的作用,以中剂量组促增殖作用最为明显(p<0.01);与对照组比较,中剂量红景天苷能明显促进hBMSCs中SCFmRNA及SCF蛋白表达(p<0.05)。中剂量红景天苷能明显抑制hBMSCs的凋亡,与对照组比较,差异有统计学意义(p<0.05)。中剂量红景天苷可上调hBMSCs中SCF、BCL-2基因表达,下调BAX mRNA表达(p<0.05)。结论红景天苷对hBMSCs有明显的促增殖作用,可能与其促进hBMSCs表达SCFmRNA及SCF蛋白有关;红景天苷可抑制阿糖胞苷诱导的hBMSCs凋亡,其机制可能与调控BCL-2/BAX表达有关。
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