论文部分内容阅读
目的：本实验通过建立重症急性胰腺炎大鼠模型,观察其肠粘膜屏障功能损伤程度,应用谷氨酰胺和清胰Ⅱ号制剂对其干预及治疗,探讨清胰Ⅱ号制剂对SAP大鼠肠粘膜屏障功能的保护作用,为其进一步开发、临床应用提供实验依据。方法：104只SD大鼠,体重240±30 g,雌、雄各半,随机分五组：假手术组(A组,n=8)、SAP模型组(B组,n=24)、清胰Ⅱ号制剂治疗组(C组,n=24)、谷氨酰胺治疗组(D组,n=24)、清胰Ⅱ号制剂加谷氨酰胺治疗组(E组,n=24)。A组开腹后仅翻动肠管；B、C、D、E组用3%牛磺胆酸钠制备SAP大鼠模型。麻醉清醒,A、B组用灌胃器按1ml/100g/次生理盐水灌胃；C组用浓度为250g/L清胰Ⅱ号制剂按lml/100g/次灌胃；D组用浓度为190mg/mL谷氨酰胺稀释液按1ml/100g/次灌胃；E组用C组加D组的方法处理。A组关腹后6小时取材,其余各组在制模后6、12、24小时三个时间点取材,每时间点取大鼠8只,观察腹腔内胰腺、胃肠道、周围组织大体及腹水情况。取胰腺组织做光镜病理检查,并行病理评分；回肠组织分别行扫描电镜、透射电镜及光镜病理检查,并行病理分级评分。采用酶联免疫吸附双抗夹心法检测血清肿瘤坏死因子-α、二胺氧化酶、D-乳酸浓度,比色反应酶活力法检测血清淀粉酶活性。结果：与A组相比,B组6、12、24小时腹水量,血清AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的浓度水平显著升高(P<0.001)；组内三个时间点的值逐渐升高,比较有差异(P<0.05)。与B组相比,C、D、E三组6、12、24小时腹水量,血清AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的浓度水平降低(P<0.05)；三组内6、24小时及12、24小时间腹水量有差异(P<0.05)；血清AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的浓度水平随时间延长逐渐升高,组内三个时间点有差异(P<0.05)。与E组相比,C、D组6、12、24小时腹水量,血清AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的浓度水平同时间点升高(P<0.05)。胰腺病理评分B、C、D、E组高于A组(P<0.05)；与B组比较,C、D、E三组在同时间点胰腺病理评分均减低(P<0.05)；与E组相比,C、D两组在同时间点上均升高(P<0.05),C、D组间无差异性(P>0.05)。回肠病理分级评分6小时B、C、D、E组高于A组(P<0.01)；12、24小时C、D、E组低于B组(P<0.05),C、D两组高于E组(P<0.05)。回肠扫描电镜：A组回肠粘膜表面微绒毛清晰、直立、凸起,排列较整齐；B组回肠粘膜及微绒毛坏死、脱落、融合,其表面见网状结构覆盖；C组回肠粘膜表面微绒毛隐约可见,萎缩变短,部分脱落,排列欠整齐。回肠透射电镜：A组肠粘膜上皮内质网、线粒体轻度肿胀,微绒毛结构正常；B组微绒毛受损、肿胀,肠粘膜上皮细胞肿胀明显,可见早期凋亡细胞。结论：SAP大鼠并发有肠粘膜屏障功能损伤及障碍；清胰Ⅱ号制剂与谷氨酰胺均能降低血清中AMY活性及TNF-a、DAO、D-乳酸的浓度,减少腹水的生成,减轻胰腺及肠粘膜的病理损害,对SAP大鼠肠粘膜屏障功能损伤可能有保护作用,且两者合用效果更好。