急性坏死胰腺炎(acute necrotizing pancreatitis,ANP)是临床上一种常见的急危重病，发病机制尚未完全阐明，治疗困难，病死率高。近年来研究表明白细胞过度激活后引起机体细胞因子瀑布样释放，导致机体免疫紊乱，并发多器官功能不全(mutiple organs dysfunction syndrome,MODS)是ANP病人发病早期死亡的主要原因之一。研究表明，核转录因子-κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)是调控机体炎症反应的总源头。NF-κB激活后，引起大量炎症介质如TNF-α，IL-1、IL-6、氧自由基，及其他炎性物质的大量释放，从而造成ANP时的机体一系列损伤。若能降低NF-κB的活性，减轻炎症介质的释放，有望成为治疗ANP的有效方法。有关雷公藤内脂醇降低NF-κB的活性，减轻ANP时的机体损伤的研究，尚未建报道。 目的 本实验拟利用大鼠ANP模型，对如下问题进行探讨：1．NF-κB的变化与ANP时体内炎症介质水平变化及其与胰、肝、肾损伤之间的关系。2．研究雷公藤内脂醇对ANP的治疗作用，雷公藤内脂醇是否能够降低急性坏死性胰腺炎时NF-κB的活性，减轻ANP时的病理损害。 方法 Wistar大鼠90只，体重300±30g，雌雄不限。随机分为三组：即假手术组(S组)，急性坏死性胰腺炎组(A组)，急性坏死性胰腺炎雷公藤内脂醇治疗组(T组)。每组30只。A组与T组动物先制成大鼠急性坏死性胰腺炎模型。大鼠郑州大学2加3届硕士研究生毕业论文雷公藤内脂醉对急性坏死性胰腺炎大鼠NF.‘B活性的影响州了寸劣硕粉沪，/早卜尹乳漪弓扩产义尹二少气甲鸽沂急性坏死性胰腺炎模型由5%牛磺胆酸钠大鼠胆胰管逆行注射制备而成。模型成功后，T组立即行雷公藤内脂醇腹腔注射0.2mg/kg，12小时/次，雷公藤内脂醇无菌蒸馏水配制，浓度0.05m留ml。S组只开腹，轻揉胰腺。术后各组于2、6、12小时点处死大鼠，每组10只。血清自动生化分析仪测淀粉酶(amylase，AMY)、丙氨酸氨基转移酶(缸an认e axninotrans丘rose，ALT)、肌配(creatinine，er)。分离血淋巴细胞，制备淋巴细胞涂片以备测其中NF一KB活性，取胰腺组织，肝组织，肾组织，其中胰腺组织固定包埋后制备组织切片行HE染色及免疫组织化学染色测其中NF一KB活性，肝组织，肾组织行HE染色及电镜检查。放射免疫法检测血清TNF一a、IL-6水平。 应用SPSS 10.0统计学分析系统，采用重复数据、单因素方差分析，对相应数据进行统计学处理。取a二0.05为显著性检验水准。结果1.血清淀粉酶水平 与S组相比，A组、T组各时间点明显升高，差异有统计学意义(P<0.05);T组与腺腺炎组相比在Zh、6h小时点差异无统计学意义(P>0.05)，12小时点腺腺炎组高于T组(P<0.05)。2.TNF一a和IL6值水平 三组之间术后2h、6h和12h差异均有统计学意义，在A组与T组二者均明显升高((尸<0.05，尸<0.05)。在2、6、12小时点T组的TNF一a和IL一6水平水平明显低于A组，有显著统计学意义(尸<0.05)。3.血清ALT水平A组与S组相比，在各时间点A组义(P<0 .05);在6h、义(P<0 .05)。点.A组ALTALT水平高于S组，差异有统计学意水平显著高于T组，差异有统计学意h与12组4.血清Cr水平在2、6小时点AS组相比、T组三者相比，差异不明显(尸>0 .05)，在12小时点三者相比有统计学意义，A组显著高于S组与T组(P<0 .05，尸<0 .05)。郑州大学加03届硕士研究生毕业论文雷公膝内脂醉对急性坏死性胰腺炎大鼠NF一KB活性的影响5.胰腺组织中和血淋巴细胞中NF一KB活性 A组在2、6小时点胰腺组织中和血淋巴细胞中高度活化，与S组、T组相比，均增高，差异有明显统计学意义(尸<0.05，P<0.05);在12小时点，三者之间差异无统计学意义(尸>0 .05)。A组在2、6小时点活化程度显著高于T组，差异有明显统计学意义(P<0.05)。6.胰腺形态学变化: 在A组胰腺组织病理损害明显，出现胰腺发黑、出血灶，胰周、肠系膜、肾周、后腹壁大量皂化斑，腹腔内大量血性腹水，在光镜下见胰腺水肿、炎细胞浸润、腺泡坏死及脂肪坏死，以6、12小时明显。T组对应各时间点相应减轻。s组各时间点均正常。肝脏组织形态学变化:光镜下可见肝脏在6小时出现肝细胞水肿，肝窦扩张，肝细胞索排列紊乱，内有炎细胞浸润，以12小时明显，肝细胞萎缩，肝窦极度扩张;电镜下表现为肝细胞线粒体肿胀、靖排列紊乱、消失，内质网肿胀，脱颗粒，细胞浆内空泡变性，以6、12小时明显。而T组对应各时间点相应减轻。S组各时间点均正常肾脏组织形态学变化:光镜下可见肾近曲小管细胞肿胀，管腔扩大，部分小管上皮坏死，炎细胞浸润;电镜下表现肾小球在各组变化不明显，A组在6、12小时点近曲小管细胞内大空泡变性，细胞极度肿胀，可见细胞坏死，微绒毛水肿，线粒体肿胀、靖排列紊乱、消失，远曲小管质膜内褶受压、线粒体肿胀。T组对应各时间点相应减轻。s组各时间点均正常。结论 1 NF一KB在大鼠急性坏死性胰腺炎早期胰腺组织、血淋巴细胞中明显激活，活性程度升高; 2 NF- KB活化与大鼠急性坏死性胰腺炎早期的炎症介质水平