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目的：通过构建人乳腺癌MDA-MB-231细胞缺氧模型，检测缺氧对MDA-MB-231细胞增殖、凋亡、毒性、干细胞标记物表达情况及克隆形成能力等的影响，探讨缺氧对MDA-MB-231细胞的干性调节作用。方法：1、应用模块化孵育小室及缺氧混合气体（94%N2，5%CO2，1%O2），体外构建MDA-MB-231细胞缺氧模型；2、实验分组：缺氧处理组和常氧对照组；缺氧处理组通过上述模型培养，常氧对照组在常氧条件下培养，两组处理完全同步；3、采用CCK-8试剂盒检测MDA-MB-231细胞増殖能力；4、应用CytoTox96非放射性细胞毒性检测法检测MDA-MB-231细胞毒性；5、使用Annexin V-FITC和PI检测MDA-MB-231细胞凋亡；6、采用流式细胞仪检测MDA-MB-231细胞干细胞标记物CD24-CD44+ESA+的表达情况。7、应用平板克隆形成实验，观测缺氧对体外培养的人乳腺癌MDA-MB-231细胞自我更新能力的影响。结果：1、缺氧对MDA-MB-231细胞生长具有轻度抑制效应，但抑制效应不明显（48小时组P>0.05）；2、细胞毒性实验缺氧处理组细胞毒性值为（9.871±0.553）%，常氧对照组细胞毒性值为（10.002±0.417）%，缺氧对MDA-MB-231细胞无明显毒性作用（P>0.05）；3、细胞凋亡实验缺氧处理组细胞凋亡率为（0.97±0.74）%，常氧对照组细胞凋亡率为（4.97±0.42）%，缺氧对MDA-MB-231细胞具有凋亡抑制作用（P<0.05）；4、干细胞标志物表达情况实验缺氧处理组细胞干细胞标志物表达率率为（3.60±0.30）%，常氧对照组细胞干细胞标志物表达率为（1.33±0.21）%；缺氧导致MDA-MB-231的CD24-CD44+ESA+的MDA-MB-231表达增高（P<0.01）；5、克隆形成实验分50、100、200细胞组，缺氧处理组克隆形成率分别为为（19.33±1.76）%、（17.67±1.45）%、（19.50±1.00）%，常氧对照组克隆形成率分别为（6.67±0.67）%、（6.67±0.88）%、（6.50±0.29）%；缺氧使MDA-MB-231细胞克隆形成率明显增高（三组P值分别为P<0.05、P<0.05、P<0.01）。结论：1、缺氧，对乳腺癌MDA-MB-231细胞无明显毒性作用，对生长无明显抑制作用，并具有抑制凋亡的作用；2、缺氧，可使乳腺癌MDA-MB-231细胞克隆形成率增加，具有干性调节作用。