胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤,恶性程度高,早期诊断困难,根治机会较少,五年生存率低。最近研究示CypA在多数肿瘤组织中高度表达。本课题组以往研究结果证实缺氧可诱导肿瘤细胞CypA表达上调。目前研究已证实CypA与肿瘤的发生、发展、耐药及转移等相关,针对CypA的RNA干扰技术、CypA蛋白抑制剂能够抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡。提示CypA可作为治疗肿瘤的新靶点。CypA与肿瘤的研究已成为热点,但关于CypA和胶质瘤相关文献相对匮乏。故本课题组拟应用免疫组织化学方法观察CypA在胶质瘤中的表达与临床病理分级和预后之间的关系,拟采用RT-PCR、蛋白印迹等技术检测缺氧对C6细胞CypA表达的影响,拟利用小干扰RNA技术和MTT比色法检测抑制缺氧所诱导的CypA表达对C6细胞增殖的影响;为深入开展CypA和胶质瘤研究,拟利用基因工程技术表达GST-CypA融合蛋白,并优化融合蛋白纯化过程。经研究证实人脑胶质瘤组织中CypA蛋白表达与胶质瘤临床病理分级、预后等因素密切相关,证实缺氧诱导C6细胞内CypA mRNA和蛋白表达水平上调,证实用小干扰RNA技术沉默缺氧诱导的C6细胞内CypA mRNA表达能够抑制C6细胞的增殖能力;成功构建pGEX-KG/CypA表达载体,并表达GST-CypA融合蛋白;用2%甲酸成功优化GST-CypA融合蛋白纯化过程,所纯化的融合蛋白具有CypA天然生物活性,为深入开展CypA和胶质瘤研究提供了保障。本研究提示:CypA可成为一个胶质瘤临床辅助诊断的分子标志物,同时可成为胶质瘤治疗的新靶点。