背景及目的肾盂输尿管连接部梗阻（Ureteropelvic junction obstruction,UPJO）是一种常见的先天性梗阻性肾病。如果不及时适当治疗,UPJO的进展可导致肾积水、肾功能不全甚至是肾衰竭。产前诊断中梗阻程度较轻的患儿出生后可恢复正常,梗阻较重的患儿出生后大多需要手术干预,但部分患儿干预后肾功能仍无法恢复正常。那么,如何早期准确评估先天性UPJO程度、预测出生后肾功能能否恢复成为了产前诊断及小儿泌尿外科的难题。本研究旨在寻找可准确、敏感、早期的评价胎儿先天性UPJO的生物学标志物,从分子水平探究UPJO介导肾脏损伤发展的分子机制,为先天性肾盂输尿管梗阻的诊断及治疗提供新思路。方法收集先天性UPJO胎儿羊水,基于同位素相对标记与绝对定量技术（isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ）对蛋白质的组学分析,对羊水分离出的外泌体蛋白进行差异表达蛋白谱分析,通过GO及KEGG分析,确定靶蛋白及通路。基于人肾小管上皮细胞HK2,用盐酸喹那普利抑制血管紧张素转化酶（angiotensin-converting enzyme,ACE）,siRNA 沉默氨基肽酶 N（aminopeptidase N,AP-N）的表达,通过EdU染色和流式细胞技术分别测量细胞增殖和活性氧（ROS）水平。通过蛋白质印迹及实时荧光定量PCR检测蛋白质表达情况。通过ELISA检测炎症因子释放水平。构建单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction,UUO）小鼠动物模型进一步在组织水平上进行功能探究。结果1.通过对外泌体的形态学及膜蛋白标志CD9、CD24的鉴定,证明所分离的外泌体确实来源于胎肾;2.通过iTRAQ定量蛋白质组学分析,与对照组相比,在羊水外泌体中共鉴定了 633种差异表达蛋白,包括376种蛋白上调,257个蛋白下调;这些差异蛋白具有多种细胞生物学功能;3.KEGG通路分析表明,肾素-血管紧张素（RAS）途径在调节先天性UPJO的进展中发挥重要作用;其通路中的关键蛋白ACE和AP-N蛋白丰度明显降低。4.RT-PCR测定验证了 UPJO患者羊水中外泌体中ACE和AP-N的相对mRNA水平比对对照组低（P<0.01）;5.基于人肾小管上皮细胞HK2的研究发现,通过抑制ACE和AP-N表达的可以抑制人肾小管上皮细胞HK2的增殖,降低其RAS通路下游蛋白AngⅡ受体的表达;6.基于单侧输尿管梗阻小鼠模型及细胞水平的研究发现,抑制ACE/AP-N可以通过RAS通路促进炎症及氧化应激反应,导致先天性UPJO的疾病进展。结论羊水外泌体ACE和AP-N可做为UPJO早期诊断中的生物学标志物;胎儿肾盂输尿管连接部梗阻引起的ACE/AP-N下调通过RAS系统抑制肾小管上皮细胞增殖、促进氧化应激反应、增强炎症因子的释放,影响肾盂输尿管梗阻的进展及后续肾功能的恢复。