猪链球菌病是一种重要的人畜共患传染病,感染猪主要引起败血症、脑膜炎、关节炎等疾病。以前,我国猪链球菌以血清型2型最为多发,近些年研究发现猪链球菌9型的感染趋势正在逐渐上升。肠外致病性大肠杆菌（Ex PEC）血清型复杂,能够定殖和感染肠外各组织器官,导致败血症、脑膜炎、肺炎、心内膜炎等。在养猪业猪链球菌病和大肠杆菌病混合感染的情况严重,目前没有商品化的疫苗可以同时用于这两种细菌性疾病的预防。亚单位疫苗具有良好的安全性及免疫原性,具有对多种血清型产生交叉保护等优点,所以本研究在实验室先前的研究基础上开展了二联多价亚单位候选疫苗免疫保护效果的评估。（1）候选蛋白分别免疫对每种菌的保护效果用猪链球菌IF-2、1022蛋白分别免疫以及混合后免疫小鼠,发现蛋白混合后的免疫组要比单个蛋白免疫组产生更高水平的抗体,这些免疫组产生的抗体水平均显著高于对照组（p<0.001）。抗体及其亚类测定结果表明,免疫蛋白可诱导高滴度的Ig G 1和Ig G2a。用5LD50剂量的菌株攻毒小鼠,实验结果表明,IF-2和1022蛋白分别为感染SS2型猪链球菌SC19菌株的小鼠提供80%和60%的保护,而IF-2和1022蛋白则为感染SS9型猪链球菌S29菌株的小鼠提供70%和80%的保护。当将这两种蛋白质混合并用于免疫时,混合后的蛋白分别可以为SC19和S29菌株提供90%和90%的保护率。再者,尝试将大肠杆菌外膜蛋白Omp C、Omo F以及分子伴侣蛋白Groe L蛋白混合免疫小鼠,用5LD50剂量的菌株攻毒小鼠,发现其对感染肠外致病性大肠杆菌PCN033菌株的小鼠提供80%的保护。且经过免疫后小鼠体内的抗体滴度有了极其显著的改变（p<0.001）。（2）候选蛋白混合免疫的保护效果将上述五种蛋白混合后免疫小鼠,观察其对猪链球菌以及猪肠外致病性大肠杆菌的混合免疫效果。结果显示,免疫组和空白对照组相比小鼠产生强烈的体液免疫应答,同时对猪链球菌SS2、SS9和猪肠外致病性大肠杆菌PCN033和E49菌株的感染具有良好的保护作用,可以分别为感染致死剂量的PCN033、E49、SC19、S29菌株的小鼠提供90%、90%、90%和80%的保护。免疫组小鼠的特异性抗体的滴度明显高于对照组小鼠（p<0.001）血清中干扰素（IFN）-γ,IL-2和IL-4的水平显著升高（p<0.001）。组织病理学观察表明,对照组病变程度明显高于免疫组。组织载菌量发现免疫组的组织载菌量和对照组相比显著性降低。