大肠杆菌三磷酸腺苷酸代谢途径操作

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原核生物细胞能量和物质代谢的途径是一个很复杂的网络,改变代谢途径中的基因会对能量和物质流产生怎样的影响,仍然不是很清楚。以往的文献和研究已经将大肠杆菌的腺嘌呤核苷酸补救合成途径研究的很透彻。使用色谱对add基因删除后大肠杆菌细胞内腺苷类核苷酸分析表明,单一基因的途径操作不能改变能量物质代谢流向。本实验通过删除了add(编码腺苷脱氨酶[EC:3.5.4.4]),deoD(编码嘌呤核苷磷酸酶[EC:2.4.2.1]),amn(编码AMP核苷酶基因[EC:3.2.2.4])并引入外源ado1基因(来自酵母),构建了菌株J991,将其在含腺苷的LB培养基培养,使用色谱分析其腺苷池发现,ATP,ADP,AMP胞内含量都有所增加,比原来增加一倍,大大加强了腺苷转化AMP的代谢流量,实现了改变物质代谢流向的目的。
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