光动力学治疗诱导卵巢癌细胞系Skov3及宫颈癌细胞系Hela凋亡的体外研究

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目的光动力疗法是近年来发展起来的一种新的肿瘤治疗方法,是通过光敏化反应达到杀伤肿瘤细胞的目的,其最大优点在于对肿瘤细胞高度的选择性和组织特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时对健康组织的损伤达到最小。光动力疗法近年来虽然已在许多领域得到应用,但在妇科肿瘤治疗方面的报道还不是很多,本研究通过观察光动力疗法对人宫颈癌细胞系Hela及卵巢癌细胞系Skov3的体外增殖及调亡的影响,探讨光动力学在妇科肿瘤治疗方面的作用。方法采用不同能量激光(O.1J/cm2、0.5J/cm2、2.5J/cm2、12.5J/cm2)(功率=53 mW)对不同浓度(O.1、0.5、1.O、2.5mM)光敏剂5-ALA处理过的人宫颈癌细胞系Hela及卵巢癌细胞系Skov3分别进行照射,照光后将细胞置入37℃,5%CO2孵箱,培养48小时后应用倒置显微镜、电镜进行形态学观察,并采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测光动力学治疗对肿瘤细胞体外生长的抑制作用,同时利用流式细胞仪检测细胞调亡情况。统计学方法采用方差分析。结果倒置显微镜下可见,实验组细胞经光动力学处理后体积缩小,细胞变形、皱缩,细胞核浓缩、深染,染色质密集成斑块状,细胞间失去彼此连接,透射电镜下可见致密的染色质沿核膜下聚集,有凋亡小体形成。形态学结果显示,经光动力学处理后的细胞改变符合凋亡的特征变化。经MTT法检测,不同浓度(分别为O.1、0.5、1.O、2.5mM)5-ALA处理过的肿瘤细胞经不同能量(0.1J/cm~2、0.5J/cm~2、2.5J/cm~2、12.5J/cm~2)激光照射后细胞的抑制率为12.9%-90.7%(Skov3)及3.9%-70%(Hela)。实验结果经统计分析显示,光敏剂浓度、光照强度对卵巢癌细胞系Skov3与宫颈癌细胞系Hela吸光度值均有影响(P<O.01),光敏剂与光照间交互作用显著(P<0.01)。并且随光敏剂浓度与光照强度的增加两细胞系吸光度值呈降低趋势,有显著的光敏剂浓度与光照时间依赖性(P<0.01)。并且不同类型细胞株对光动力学作用的反应存在差别(P<0.01)。对宫颈癌细胞系Hela,当光敏剂浓度>1.0mM光照强度>2.5 J/cm2时,吸光度值下降已不明显。流式细胞仪定量分析最大细胞凋亡率在细胞Hela和Skov3细胞分别为68.2%和60.5%,亦存在细胞间的差异。结论光动力学治疗对体外生长的人卵巢癌细胞系Skov3及宫颈癌细胞系Hela有抑制作用。
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