【摘 要】
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本论文以同属不同种的4 种欧洲花楸(分别命名为R1,R2,R3,R4)的种子为试材,经诱导萌发获得无菌试管苗,并以其为外植体进行组织培养,建立了4 种花楸的茎尖再生体系、R1 的叶片
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本论文以同属不同种的4 种欧洲花楸(分别命名为R1,R2,R3,R4)的种子为试材,经诱导萌发获得无菌试管苗,并以其为外植体进行组织培养,建立了4 种花楸的茎尖再生体系、R1 的叶片分芽培养基以及R2、R4 的高效生根培养基。其中重点对影响花楸试管苗生根的因子,例如内源激素、黑暗条件、蔗糖、苗龄、剪切叶位等进行了研究。结果表明暗培养和两步生根法均可使3 种难生根花楸(R1,R2,R3)的生根率有所提高,特别是对R2 的作用尤为显著,使其生根率由原来的16.6%上升到67.9%。另外,苗龄和叶位对生根的影响也很大,但蔗糖浓度对生根的影响并不显著。针对4 种花楸生根难易的不同,在试管苗生根期间,对影响生根的3 种酶(吲哚乙酸氧化酶、过氧化物酶、多酚氧化酶)的活性、可溶性蛋白的含量、可溶性蛋白电泳图谱以时间为梯度进行了跟踪测定。将测定结果与观察到的试管苗生根状态对照,发现易生根与难生根的花楸在生根过程中酶的活性变化有其各自的特点:对于易生根的R4、R2,生根培养起始时期IAAO 和POD 活性处于相对低水平,随着试管苗基部的膨大其活性升高,生根高峰时期IAAO 和POD 活性下降到较低水平,根伸长时期又回升;但对于难生根的R1、R3,生根培养起始时期IAAO 和POD 活性处于相对高水平,随后IAAO 有一个可能与愈伤组织形成有关的峰值,而POD 一直缓慢下降。由此得出了三种酶的酶量并不是决定花楸生根的关键因素,而是酶活性的动态变化与生根密切相关。试管苗生根培养起始时期酶活性的差异可能是不同品种花楸生根难易差异的一个重要影响因素。另外,在R2、R4 生根过程中某些蛋白条带的出现与消失与生根高峰在时间上的一致,说明这些蛋白与生根密切相关。
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