神经型一氧化氮合酶、可溶性鸟苷酸环化酶α1和β1亚基在肌肉系统中表达的研究

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一氧化氮作为一种新型生物信息递质,通过一氧化氮-可溶性鸟苷酸环化酶-环磷酸鸟苷信号通路(NO/sGC/cGMP)信号通路,几乎对哺乳动物机体的各个系统都有一定的作用。在生理情况下,由cNOS少量合成并释放的NO参与着众多生理功能的调节。NO通过自分泌方式弥散入细胞,激活鸟苷酸环化酶,升高胞内环鸟苷酸(cGMP)水平,cGMP作用于环鸟苷酸依赖性蛋白激酶(PKG)、磷酸二酯酶(PDE),广泛参与心血管及骨骼肌代谢作用的靶蛋白。以猪为实验对象,采用常规免疫组化法,运用神经元型一氧化氮合酶(nNOS),sGCα1及sGcβ1的单抗检测不同类型肌肉组织和不同部位的骨骼肌,进行nNOS、sGCα1及sGCβ1在整个肌肉系统中的定位分布。结果显示:nNOs在各类型肌肉中都有表达,sGCα1只有在心肌中表达呈阴性,sGCβ1在三种类型肌肉中表达均呈阳性,且sGCα1及sGCβ1在三种不同部位骨骼肌:膈肌、眼肌、腰大肌表达均为阳性。研究结果为进一步探讨NO/sGC/cGMP信使通路在肌肉组织中的作用机制具有重要意义。实验通过采用两种不同的饲料(普通饲料和改进的高脂饲料)以两种不同的喂养方式饲喂大鼠8周(A组:断奶开始饲喂高脂日粮,B组:青春期开始饲喂),观察高脂饲料配方对制造营养性超重大鼠动物模型的影响。喂养8周后,对照组体重为354.16±8.68,处理A组体重为390.26±18.47,B组体重为382.31±19.40。A组和B组的脂肪重量及其重量系数、肝脏体比较对照组均差异显著(P<0.05或P<0.01),除SOD在组间差异不显著外,A组和B组的血浆总胆固醇、血糖、MDA均差异显著(P<0.05或P<0.01)。B组大鼠的睾丸的精细管的结构改变,而A组则明显性早熟。以高脂日粮饲喂刚断奶大鼠8周,可以成功建立单纯性营养超重模型,在青春期开始饲喂高脂日粮,脂肪主要在性腺轴器官堆积,并可以引起雄性大鼠的不育。通过饲喂高脂日粮建立幼年大鼠的超重模型后,运用nNOS、sGCα1及sGCβ1的单抗检测心肌、平滑肌和不同部位的骨骼肌(典型的白肌趾长伸肌和典型的红肌比目鱼肌),探寻NO/sGC/cGMP在幼年超重大鼠的肌肉系统中表达情况。结果显示高脂处理A组和B组中除在心肌中sGcα1和β1的表达有增加的趋势外,平滑肌和骨骼肌中NO/sGC信号通路在蛋白水平上均受到抑制。并对骨骼肌的典型白肌和红肌进行肌湿重的测定及骨骼肌细胞横切面积的测定,发现高脂日粮的摄入可以通过某些特定的代谢途径增加白肌纤维的量,同时使红肌纤维增粗,简而言之即可以诱导红肌纤维的转化。
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