丁基苯酞是国家一类新药,可有效治疗脑血管病,其中起主要作用的是(S).丁基苯酞。本课题通过选择最合适的技术路线及构建的最佳转化体系实现了外消旋丁基苯酞的高效拆分。用GC—MS和NMR鉴定了外消旋丁基苯酞的结构和纯度,并用手性液相色谱制备了丁基苯酞的单一对映体标样和建立了适合检测丁基苯酞的方法。丁基苯酞具体的检测方法为:样品通过手性固定相高效液相色谱进行分析,条件为Chiralcel OD—H柱,流动相为正己烷/异丙醇(98:2),流速0.5 ml/min,检测波长为256 nm。理论设计上考虑了15个拆分方案,但实际上只有三种实际上可行,即:外消旋丁基苯酞的对映体选择性酸解、以烯酯为酰基供体的丁基苯酞的转酯化反应和以乙酸酐为酰基供体的酰化反应,反应介质为有机溶剂。对于Novozyme435催化的外消旋丁基苯酞的对映体选择性酸解反应,研究了有机溶剂性质参数、水活度、丁基苯酞浓度、乙酸与丁基苯酞的摩尔比、加酶量、转速和转化时间对反应的影响。酸解反应的最适条件为:溶剂为正己烷,水活度O.54,丁基苯酞浓度0.5%(v/v),乙酸与丁基苯酞的摩尔比10:1,酶浓度8 mg/mL,转速150 r/min,转化时间64小时。在此反应条件下,丁基苯酞的转化率为14.7%。对于Novozyme435催化的分别以乙酸乙烯酯为酰基供体的外消旋丁基苯酞的对映体选择性转酯化反应和乙酸酐为酰基供体的外消旋丁基苯酞的对映体选择性酰化反应,研究了单溶剂、二元混和溶剂、含水量、丁基苯酞浓度、酰基供体与丁基苯酞摩尔比、酶浓度、转速和转化时间对反应的影响。构建了最适的二元反应介质:65%(mol/mol)的四氢呋喃和35%(mol/mol)的正己烷。其它最适反应条件为:25.O mM丁基苯酞,0.4% (v/v)水,0.2 M乙酸乙烯酯(或乙酸酐)和8 mg/mL Novozyme 435,反应混合物在30℃的摇床上150 r/min反应40 h(以乙酸酐为酰基供体时,48 h)。反应后,对于转酯化反应,丁基苯酞的转化率和ee值可分别达到49.2%和96.8%;对于酰化反应,丁基苯酞的转化率和ee值可分别达到49.0%和95.7%。水在Novozyme 435催化的外消旋丁基苯酞的拆分反应中起着关键性的作用。在研究中分别用不同的控制体系中水含量的方法对Novozyme 435催化的外消旋丁基苯酞的对映体选择性酸解、外消旋丁基苯酞的对映体选择性转酯化反应和外消旋丁基苯酞的对映体选择性酰化反应。结果表明水合盐(饱和盐溶液)预平衡法控制水含量适合于外消旋丁基苯酞的对映体选择性酸解,向体系中直接加水法控制水含量和先用水合盐预平衡然后直接向反应体系中加水合盐法控制水含量适合于以转酯化反应和酰化反应。不过向体系中直接加水控制水含量法需要相应的二元反应介质:65%(mol/mol)的四氢呋喃和35% (mol/mol)的正己烷。对于上述三种拆分丁基苯酞的路径,其最适的路径是转酯化反应。在此反应中可获得>49%的产率和对映体纯度>96%ee的对映体过量值的丁基苯酞。