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目的:1、观察腰椎间盘突出症患者的性别、年龄、病程、体重情况、职业特点、椎间盘退变程度Pfirrmann分级标准、疼痛程度及性质等指标与中医证型的相关性; 2、比较不同证型之间退变椎间盘髓核组织中的MMP-2、MMP-13表达是否存在差异; 3、通过检测MMP-2和MMP-13在退变椎间盘髓核组织中的表达情况,分析探讨二者之间是否存在相关性。 方法:1.临床研究根据腰椎间盘突出症的诊断标准、中医证型分类标准制定调查计划。取自2016年4月一2017年1月期间因腰椎间盘突出症在陕西中医药大学附属医院脊柱骨科住院期间行腰椎间盘突出症椎间孔镜髓核摘除术或者单纯开窗髓核摘除术的患者,参考国家中医药管理局制定的《中医病证诊断疗效标准》为标准,分别纳入气滞血瘀证组和肝肾亏虚证组,每组各20例。调查内容包括患者的一般情况,中医证候特征,椎间盘退变程度Pfirrmann分级标准等,运用现代统计学方法,探讨这些客观指标与中医证型的相关性。 2.实验研究标本来自上述临床研究中两组证型患者的髓核组织,分别纳入气滞血瘀证组和肝肾亏虚证组,每组各20例。术中将取出的髓核组织与纤维环进行分离后立即用无菌生理盐水清洗干净,放入标本袋中,倒入甲醛溶液完全浸渍,固定24小时后送进实验室包埋、切片。采用HE染色观察退变椎间盘髓核组织的形态学变化,采用免疫组化方法检测MMP-2、MMP-13在退变椎间盘髓核组织中的表达情况。 结果:1.临床研究调查腰椎间盘突出症患者40例,其中气滞血瘀证患者和肝肾亏虚证患者各20例。 两组中医证型患者的性别、体重情况、职业特点比较,P〉0.05,差异无统计学意义。 两组中医证型患者的年龄和病程经单因素方差分析,P<0.05,差异有统计学意义。 在椎间盘退变程度Pfirrmann分级标准方面,两组中医证型的等级分布比较,经非参数检验,P<0.05,差异有统计学意义。 在疼痛程度方面,比较疼痛评分(VAS评分)在两组中医证型之间的差异,经单因素方差分析,P<0.05,差异有统计学意义。 在疼痛性质方面,比较疼痛性质在两组中医证型之间的差异,经非参数检验, P<0.05,差异有统计学意义。 在日常活动能力方面,比较日常活动能力在两组中医证型之间的差异,经单因素方差分析,P<0.05,差异有统计学意义 2.实验研究 HE染色光镜观察结果髓核细胞分布杂乱,细胞核为深蓝色,周围组织呈红色,排列杂乱,部分髓核细胞有空泡样改变。 免疫组化染色结果 MMP-2、MMP-13在标本中均有有一定程度的表达, MMP-2、MMP-13定位于髓核细胞质中,免疫组化染色免疫反应阳性物染色为棕色,细胞核染色为蓝色。 MMP-2的表达情况 MMP-2在气滞血瘀组、肝肾亏虚组的阳性表达率分别为(43.07±4.01)%、(74.93±12.05)%。两组中医证型之间MMP-2阳性表达率经单因素方差分析,F=62.974,P=0.000〈0.05,差异有统计学意义。 MMP-13的表达情况 MMP-13在气滞血瘀组、肝肾亏虚组的阳性表达率分别为(46.75±7.34)%、(77.41±10.15)%。两组中医证型之间MMP-13阳性表达率经单因素方差分析,F=59.950,P=0.000<0.05,差异有统计学意义。 退变椎间盘髓核组织MMP-2的阳性表达率与MMP-13的阳性表达率具有正相关性(r=0.712,P=0.000<0.05)。 结论:患者的性别、体重情况、职业特点与腰椎间盘突出症中医证型无明显相关性。 年龄、病程、椎间盘退变程度Pfirrmann分级标准、疼痛程度、疼痛性质、日常活动能力与腰椎间盘突出症中医证型有一定相关性,可作为中医辨证分型的参考指标。随着病程延长,肝肾亏虚型发病率呈上升趋势。在椎间盘退变程度Pfirrmann分级标准方面,气滞血瘀型多见于II级和III级,肝肾亏虚型多见于IV级、V级。在疼痛性质方面,气滞血瘀型多见于刺痛,肝肾亏虚型多见于酸痛。 肝肾亏虚型组髓核组织中的MMP-2、MMP-13阳性表达率明显高于气滞血瘀型,可作为区分两种证型的参考指标,为中医辨证分型的客观化、规范化提供依据。 MMP-2和MMP-13在退变椎间盘髓核组织中有明显的正相关性,推测MMP-2与MMP-13可能参与了相互调节的过程。