背景：　　龙葵碱是从中药龙葵中提取的最重要且有效的成分，并被证实能对抗多种肿瘤细胞。但其在结直肠癌中的作用及相关分子机制仍待进一步阐明。　　目的：　　在本研究中，我们分别从体内和体外两方面探讨了龙葵碱对结直肠癌细胞的作用及相关机制。　　方法：　　1.细胞培养及药物储存：结直肠癌细胞（SW480,SW620, HT-29）分别由加入10%胎牛血清的RPMI-1640培养基或McCoy’s 5A培养基培养，所有细胞均置于含5%二氧化碳加湿恒温（37℃）的培养箱内孵育。龙葵碱溶解于二甲基亚砜中，使用时由相应培养基稀释成需要浓度（二甲基亚枫的终浓度小于0.1%）用于体外实验，由磷酸盐缓冲液稀释成需要浓度用于体内实验。　　2.细胞活性检测实验：将结直肠癌细胞分别用不同浓度的龙葵碱（0, 1, 2.5, 5, 7.5, 10, 12.5, 15微摩尔每升）处理24小时或10微摩尔每升的龙葵碱处理不同时间（12, 24, 48, 72小时）后用细胞计数试剂（CCK-8）检测细胞活性。　　3.平板克隆形成实验：将结直肠癌细胞用不同浓度的龙葵碱（0, 2.5, 5, 7.5微摩尔每升）处理21天，最终对细胞克隆集落进行拍照及计数。　　4.细胞周期分析：将结直肠癌细胞用10微摩尔每升的龙葵碱培育24小时后，按照细胞周期检测试剂盒说明处理样品，用于流式分析。　　5.细胞凋亡实验：将结直肠癌细胞用10微摩尔每升的龙葵碱培育24小时后，按照细胞凋亡检测试剂盒说明处理样品，用于流式分析。　　6.细胞迁移与侵袭实验：将种植于迁移小室的结直肠癌细胞用 2.5 微摩尔每升的龙葵碱培育24小时后，固定染色，在显微镜下观察细胞迁移与侵袭进程。　　7.蛋白质印迹法：将结直肠癌细胞用10微摩尔每升的龙葵碱培育24小时后，收集细胞并提取蛋白，用蛋白质印迹法检测S100P蛋白表达水平。　　8.动物实验：在 4-6 周大的裸鼠侧翼皮下成瘤，当瘤体成型可测量后，随机分为高浓度组、低浓度组及对照组（每组各 7 只），分别给予高浓度组裸鼠10毫克/千克(体重)浓度的龙葵碱（两天腹腔注射1次，持续21天），低浓度组裸鼠5 毫克/千克 (体重)浓度的龙葵碱，对照组裸鼠仅给予磷酸盐缓冲，每天监测裸鼠体重及皮下肿瘤大小，给药两周后处死裸鼠，无菌操作下分离皮下肿瘤。　　9.慢病毒载体的构建与转导：之前在我们的实验室中已经产生了针对S100P或S100P基因的shRNA的慢病毒载体（shS100P：5-AAC TCA CTG AAG TCC ACC TGG GCA TCT CC-3）。慢病毒产生和转导按照前述方法进行。　　结果：　　1.龙葵碱能抑制结直肠癌细胞（SW480,SW620,HT-29）的生长，且与其龙葵碱浓度及暴露时间相关。　　2.随着龙葵碱浓度增加，结直肠癌细胞形成克隆集落的数量显著减少。　　3.龙葵碱能影响结直肠癌细胞周期进程，诱导细胞周期阻滞在G0/G1期。　　4.龙葵碱能诱导结直肠癌细胞凋亡。　　5.龙葵碱能抑制结直肠癌细胞迁移与侵袭的能力。　　6.龙葵碱能抑制结直肠癌细胞在体内的生长。　　7.由龙葵碱处理后的结直肠癌细胞中S100P的蛋白表达量明显下降。通过过表达结直肠癌中的 S100P，发现能部分反转由龙葵碱诱导的对细胞的生长抑制作用，同样的，敲低S100P后能显著增强由龙葵碱诱导的生长抑制作用。　　结论：　　在本研究中我们发现，龙葵碱能抑制结直肠癌细胞在体外的生长、迁移和侵袭并诱导细胞周期阻滞和凋亡，还能抑制肿瘤的体内生长。此外，龙葵碱能抑制S100P 的表达。通过过表达 S100P 能部分逆转龙葵碱对结直肠癌细胞生长抑制作用。相反，当 S100P 基因被敲低后，对结直肠癌细胞的生长抑制作用也明显增强，通过这些结果我们认为龙葵碱的作用机制与下调S100P相关。