随着Bt杀虫剂的长期使用,害虫对Bt杀虫产生的抗性受到人们的广泛关注和深入研究。在多种抗性管理策略中,筛选新的Bt杀虫菌株,挖掘杀虫新毒素是延缓害虫抗性的有效方法。本研究从全国不同地区不同土壤类型采集了 118份样本,利用温度筛选法分离得到了五株野生型Bt菌株,镜检观察发现均能产生典型的菱形晶体,PCR分析表明菌株均含有cry1类基因。将66号土样筛选到的Bt菌株命名为Bt 6618,并进行形态特征镜检和16S rRNA基因鉴定。采用SDS-PAGE和液质联用质谱仪(LC-MS/MS)分析鉴定到该菌株产生的130kDa蛋白主要由Cry1Ae和Cry1Ac原毒素组成并对得分最高的cry1Ac进行克隆及序列分析,结果表明该菌株所含的cry1Ac基因与已经公布的的cry1Ac1基因序列一致,而cry1Ae基因编码区序列的研究将在后续进行。该菌株的芽胞晶体混合物对棉铃虫初孵幼虫具有显著的杀虫效果,LC5o为55μg/mL。此外,我们对现有已知Bt菌株的杀虫基因进行挖掘。电镜扫描观察本室保藏的一株苏云金芽胞杆菌4U1菌株产生的晶体形态为椭圆形。SDS-PAGE分析表明该菌株主要表达130kDa毒素蛋白,PCR分析结果表明该菌含有cry7类和cry8类基因。质谱鉴定到该菌株原毒素组分主要为Cry7类和Cry8类蛋白。对该菌株中的cry8类基因进行克隆与序列分析,结果显示该基因与ARP110菌株中某毒素基因的CDS序列完全一致,这是该基因在4U1菌株的首次发现。毒力生测表明该菌株芽胞晶体混合物对棉铃虫初孵幼虫毒力较低,对其它害虫的毒力还有待分析。本研究筛选得到的高毒力Bt菌株将丰富我国苏云金芽胞杆菌的储备,为发展新的高效生物杀虫制剂提供资源。