早期嗅觉剥夺对SD大鼠海马的影响的研究

来源 :河北医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:zth123456
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目的:嗅觉系统是人类感觉系统中最原始、最重要的系统之一,嗅觉是一种感觉,人和动物通过嗅觉来分辨气味、辨别种族、联络同类等;是动物觅食、认物、情感交流及求偶的重要途径之一,海马脑区有着管理学习记忆的能力,而学习记忆是高级哺乳动物所特有的高级神经活动。海马脑区不仅和陈述记忆有关,而且与空间辨别性记忆也有着密切联系。本文就嗅觉剥夺对海马回影响、大脑中枢神经发育初期由于嗅觉损伤所致的发育迟缓与学习记忆及行为异常可能的作用进行探讨。方法:分别取SD大鼠36只(本实验大鼠由河北医科大学动物实验中心提供),体重在75-115g之间,平均体重为100±12克。上述实验大鼠均在笼中喂养,保持在室温23℃-25℃之间,利用随机数字表法将上述研究对象分为空白对照组、嗅觉剥夺组,每组18只。结果:1一般形态观察研究结果发现嗅觉剥夺组此时幼鼠表现安静、体形偏小、反应迟钝且无趋利避害意识,对其进行称重发现其平均体重为67.16±4.98g。对照组表现活跃、体态发展正常、反应灵敏、存在趋利避害意识,对其进行称重后发现,其平均体重为89.06±5.11g。对两组的体重进行比较发现存在差异,且差异有统计学意义(t=5.11,P=0.03)。2尼氏染色结果空白对照组中海马齿状回神经元数目为(1048.1),嗅觉剥夺组中海马齿状回神经元数目为(947.9),两组之间比较有差异,差异有统计学差异(P<0.05)。3 MORRIS水迷宫实验结果3.1定位航行实验研究结果发现空白对照组的逃避潜伏期为4.9±1.2小时,嗅觉剥夺组的逃避潜伏期为8.8±1.1小时,对两组进行比较,发现两组结果之间有差异,差异有统计学意义(t=5.88,P=0.02)。3.2空间探索实验研究结果发现对上述两组患者进行空间探索实验发现:空白对照组的空间探索实验结果较嗅觉剥夺组有所增加,两组患者进行比较发现有差异,差异有统计学意义(P<0.05)。4免疫组织化学法检测结果4.1δ亚基免疫组化结果免疫组织化学染色显示,空白对照组和嗅觉剥夺组中Neu N阳性细胞主要分布在海马齿状回的颗粒细胞层或多形层,两组在分子层均有少量分布,不同时间点下其Neu N阳性细胞分布不同,4w后,空白对照组与嗅觉剥夺组在亚基免疫组化结果方面存在差异,差异有统计学意义(P<0.05);4.2累积吸光度法分析结果运用累积吸光度法(IOD)分析α5亚基免疫组化结果,实验结果发现空白对照组与嗅觉剥夺组在亚基免疫组化结果方面存在差异,差异有统计学意义(P<0.05)。5荧光定量PCR结果5.1 PCR扩增凝胶成像利用q-PCR之前做RT-PCR,实验结果发现空白对照组与嗅觉剥夺组之间比较有差异,差异有统计学意义(P<0.05)。5.2δ亚基荧光定量PCR实验过程中δ亚基与内参GAPDH的实时荧光定量PCR融解曲线一般为单一峰,如果该PCR融解曲线表现为单一峰则表示二者均为特异性表达,且为扩增曲线良好。研究结果发现,两组患者的δ亚基荧光定量PCR结果:空白对照组与嗅觉剥夺组在δ亚基荧光定量PCR结果比较有差异,且差异有统计学意义(P<0.05)。5.3α5亚基荧光定量PCR研究发现α5亚基与内参GAPDH的实时荧光定量PCR融解曲线为单一峰,实验过程中二者均为特异性表达,并且扩增曲线良好。研究结果发现,两组患者的α5亚基荧光定量PCR结果:空白对照组与嗅觉剥夺组在α5亚基荧光定量PCR结果比较有差异,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论:1嗅觉剥夺会影响大鼠的基本形态功能。2嗅觉剥夺会影响大鼠的神经元的分化。3嗅觉剥夺会影响海马中Neu N分布与表达。4嗅觉剥夺会影响海马中δ亚基与α5亚基的GABAA受体的分布与表达。
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