地衣芽孢杆菌对部分水果采后病害生防机理及其防病作用研究

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地衣芽孢杆菌W10菌株是一株新型生防细菌,可以代谢抗菌蛋白。该细菌及其抗菌蛋白对水果贮藏期的苹果轮纹病菌(Botryosphaeria berengeriana f. sp. Piricola)、炭疽病菌(Glomerella cingulata)和柑桔青霉病菌(Penicillium sp.)具有拮抗作用;对苹果、柑桔采后的轮纹病、炭疽病和青霉病有较好的防病作用。W10菌液、培养滤液、抗菌蛋白对3种病原菌菌丝形态和生长都有明显的破坏与抑制作用。对菌丝形态的破坏主要表现为使菌丝肿胀;原生质收缩,菌丝细胞内出现空泡;菌丝膨大成泡囊;菌丝扭曲;菌丝细胞原生质渗漏;菌丝细胞壁裂解,菌丝断裂等。菌液、培养滤液和抗菌蛋白对病菌的作用方式一致,但是菌液处理的病菌菌丝被破坏程度更为严重。培养滤液及其抗菌蛋白稀释10倍时,对轮纹病菌菌丝的作用最强,抑制率为100%,对炭疽病菌的抑制率分别达90.2%、94.9%,对青霉病菌的抑制作用稍弱,分别为50.1%和77.5%。W10对病菌的产孢、孢子萌发和芽管生长也有一定影响。抗菌蛋白稀释20倍时,对轮纹病菌和炭疽病菌的产孢、孢子萌发和芽管生长的抑制率都达到100%,虽然对青霉病菌的抑制作用有所下降,但对产孢、孢子萌发和芽管生长的抑制率仍分别达到75.3%、86.8%和68.4%。以上结果说明W10具有防治上述3种水果贮藏期病害的潜力,但对不同病菌的效果有一定差异。生防细菌W10能够在苹果和柑桔果表定殖,时间均超过15d,定殖能力与温、湿度、引进细菌的浓度、水果果面有无病菌等因子有关。生防细菌定殖的最佳条件一般为:温度15℃,相对湿度95-100%。在一定的温度范围内(5-15℃),温度越高,越有利于细菌的生长与定殖。生防菌的定殖能力还与最初引进的细菌浓度呈正相关,即引进的浓度越高,定殖时间越长,果面菌量也越大。引进细菌浓度为1010cfu/ml时,15d后在苹果果表的菌量仍为6.19×10~2cfu/cm~2,30d后在柑桔上的菌量仍为1.06×10~2cfu/cm~2。水果果面有病菌存在时对生防菌定殖有较大影响,引进生防细菌24h后接种病原菌的果实,其表面菌量要比生防细菌与病原菌同时接种,或接种病原菌后24h再接种生防细菌的菌量大,即病菌先于生防菌占领果面对生防菌的定殖不利。比较生防细菌在苹果和柑桔上的定殖,以柑桔果实更有利于细菌定殖,表现在定殖时间长,菌量多。生防细菌W10及其抗菌蛋白对3种水果采后病害都有防治作用,防效与多菌灵相似。最高防效为抗菌蛋白使用15d时对苹果轮纹病的防治,达66.7%;90d时防效仍达到50.0%。对柑桔青霉病的防效稍低,但75d时仍达28.6%。环境条件对菌液与抗菌蛋白的防效有一定影响,但一般对抗菌蛋白的影响要小于对菌液的影响。防治苹果轮纹病、炭疽病,在低温10℃、低湿度RH 35-40%条件下,用高浓度菌液(1010cfu/ml)或抗菌蛋白在病菌定殖前处理苹果果实能收到较好的防病效果;其中15℃对苹果轮纹病、炭疽病和柑桔青霉病的防治都是最有利的使用温度。在适宜生防菌发挥生防作用的条件下,生防菌不仅可以抑制病斑扩展,而且可以推迟果实的发病期,在防治苹果轮纹病、炭疽病中,可推迟发病期达20d以上。生防菌及其抗菌蛋白与钙离子结合使用可以提高生防菌的防病效果。在抗菌蛋白中加入钙离子对苹果炭疽病的防效达到100%,比单独使用抗菌蛋白提高了29.3%;对柑桔青霉病的防效比单独使用抗菌蛋白提高了7.7%。
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