萜类化合物数量众多，结构多样，普遍存在于植物和微生物的次级代谢产物中。随着越来越多的萜类化合物的发现，对萜类合酶的研究也更加深入，这不仅可以帮助从理论上认识萜类化合物的合成机制，理解萜类合酶结构和功能的关系，还有助于进一步研究其在药物、香精等方面的应用。以本实验室前期初步实验结果（ADS的C末端6个氨基酸截短活性下降）为基础，利用软件对催化机制不同的三种倍半萜合酶进行比较，在相应位置进行截短，明确C末端保留几个氨基酸能够保留其原有活性，以探讨此效应是否有普遍性，具体工作如下：　　1.为探讨 C末端对倍半萜环化酶功能的影响，选择对黄花蒿紫穗槐二烯合酶（ADS）C末端进行点突变，取纯化后的蛋白在相同酶浓度下对相同浓度底物进行体外催化，催化生成的产物经GC-FID分析，同时用MG法测定酶动力学参数 Km和 Kcat，发现：C1-C10截短不改变酶催化生成的产物，C1-C6截短从酶动力学参数上来看，其活性没有明显变化，C7-C10活性降低，没有用此方法测出动力学参数。　　2.为探讨 C末端对非环化倍半萜合酶功能的影响，选择对非环化酶法呢烯合酶（BFS）C末端进行点突变，取纯化后的蛋白在相同酶浓度下对相同浓度底物进行体外催化，催化生成的产物经GC-FID分析，同时用MG法测定酶动力学参数Km和Kcat，发现：C1-C10截短不改变酶催化生成的产物，C1-C6截短从酶动力学参数上来看，其活性没有明显变化，C7-C10活性降低，没有用此方法测出动力学参数。　　3.为探讨 C末端对反式倍半萜环化酶功能的影响，选择反式环化酶烟草马兜铃烯合酶（EAS）C末端进行点突变，取纯化后的蛋白在相同酶浓度下对相同浓度底物进行体外催化，催化生成的产物经 GC-FID分析，同时用MG法测定酶动力学参数Km和Kcat，发现：C1-C10截短不改变酶催化生成的产物， C1-C6截短从酶动力学参数上来看，其活性没有明显变化，C7-C10活性降低，没有用此方法测出动力学参数。　　结合三种倍半萜合酶的结构信息，我们发现三种酶C末端1-10个氨基酸的截短不会改变产物，α螺旋上的氨基酸会降低酶活性，而α螺旋以外的氨基酸的截短与野生型相比，在活性上没有明显变化。