长链非编码RNA MEG3、ST8SIA3和TUG1在肺癌中的表达研究

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:panshuangchun
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背景肺癌是严重危害人类健康的主要恶性肿瘤之一,也是全世界目前死亡率最高的癌症。由于目前缺乏有效的肺癌早期诊断手段,绝大多数肺癌在临床确诊时已属晚期,从而致使肺癌病死率居高不下,因此,肺癌早期诊断是决定患者预后的关键因素,而分子生物学研究结果将有助于肺癌的早期诊断。同人类其他的恶性肿瘤一样,肺癌的发生发展是癌基因活化、抑癌基因失活等多基因共同作用的结果。但肺癌的发生、发展转移等影响因素和机制是非常复杂的,现有的证据还不足以完全解释肺癌的发病原因。随着分子生物学以及基因诊断技术的日新月异,越来越多的证据表明,长链非编码RNA(lncRNA)与癌症的发生存在密切的关系,而且,特异性lncRNA可作为肿瘤的预测因子。长链非编码RNA (lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的功能性RNA分子,lncRNA种类众多,位于细胞核或胞质内,以RNA形式在多种层面上调控基因的表达水平即表观遗传水平、转录水平和转录后水平调控基因的表达,广泛参与机体几乎所有生理和病理过程。越来越多的证据表明,异常的lncRNA可能在肿瘤发生中起着重要的作用。lncRNA差异表达于正常组织与其相应不典型增生的组织及肿瘤中,特异性lncRNA可作为肿瘤的预测因子,失调的lncRNA可通过多种途径调节DNA甲基化、组蛋白修饰、染色质重构和作为miRNA的前体,在肿瘤的发生和发展中发挥重要作用。对lncRNA的研究将有助于理解生命体多层次的表达调控网络,并有望为复杂疾病的预测、诊断、和治疗提供新的分子依据。目的采用实时荧光定量检测肺癌及癌旁正常组织中长链非编码RNA MEG3、 ST8SIA3和TUG1的差异表达,进行靶基因预测其靶点,探讨其在肺癌发生发展中的机制及其作用。方法收集昆明医科大学附属第三医院2011-2012年住院患者外科手术切除的肺癌组织及癌旁的正常组织(癌旁的正常组织离癌组织5cm以上),取下后10分钟以内放入预先装有RNAlater溶液的试管中,先在-4℃侵泡8小时然后放入-80℃冰箱中长期保存。术后通过查阅病理切片记录确认组织病理类型,成功收集14例鳞癌33例腺癌。分别提取总RNA、对RNA分别进行SYBR Green荧光定量PCR,以β-actin作为内参以检测其在正常组织和肺癌组织中的相对表达量,2-△△CT值表示组织中相对表达量,采用t检验,Spearman等级相关分析RNA的相对表达与TNM分期以及免疫组化之间的关联性。结果1)共收集47例样本,其基本情况:民族均为汉族;组织类型腺癌33例,鳞癌14;年龄为最大71岁最小32岁平均值54.91±9.62;性别为男32例女15例;吸烟的29例占62%;饮酒的22例占47%;分化程度为:低分化18例,中分化28例,高分化1例;GSTπ:5例(-)、15例(+)、9例(++)、3例(+++);PgP:7例(-)、14例(+)、9例(++)、2例(+++)、TOPO Ⅱ:6例(-)、20例(+)、6例(++);LRP:2例(-)、14例(+)、13例(++)、3例(+++)、MRP:4例(-)、13例(+)、15例(++);P53:9例(-)、15例(+)、7例(++)、1例(+++);Ki67:5%-90%平均数为32.67%。2)MEG3在癌组织中的相对表达量明显低于癌旁正常组织(P<0.05);3) TUG1在癌组织中的相对表达量明显低于癌旁正常组织(P<0.05):3) ST8SIA3在癌组织中的相对表达量与癌旁正常组织在统计学上没有差异(P>0.05);4) ST8SIA3与TOPOⅡ成负相关(r=-0.47,P=0.00);5)TUG1与TOPOⅡ成负相关(r=-0.42,P=0.01);6) ST8SIA3和淋巴转移(N)成正相关(r=0.29,P=0.04)。结论1) MEG3、TUG1在肺癌组织中较癌旁正常组织中表达明显下调,提示MEG3、 TUG1可能在肺癌发生发展过程中起抑癌基因的作用;2) ST8SIA3在肺癌和癌旁正常组织中的表达没有显著差异,但与TNM分期中淋巴转移(N)成正相关,与临床指标TOPO Ⅱ成负相关,为将来ST8SIA3在肺癌中的研究提供线索。
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