前列腺素E1对阻塞性黄疸大鼠肝细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

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目的探讨前列腺素E1(prostaglandin E1,PGE1)对阻塞性黄疸大鼠肝细胞凋亡及iNOS/NF-κB的影响;了解阻塞性黄疸大鼠肝细胞凋亡与凋亡相关基因iNOS/NF-κB表达间的相互关系;研究前列腺素E1对损伤肝功能发挥保护作用的可能机制,为前列腺素E1应用的进一步研究提供理论依据。方法选择健康雄性Wistar大鼠72只,采用胆总管双重结扎术致胆汁淤积建立动物模型,随机将大鼠平均分为三组:假手术组(SH组),胆总管结扎组(BDL组),胆总管结扎+前列腺素E1给药组(PGE1组),其中假手术组仅将胆总管暴露并充分游离而不予结扎。完成动物模型制备后, PGE1组每日给予尾静脉注射PGE13μg.kg-1,SH组及BDL组给予尾静脉注射等容量0.9%氯化钠溶液。各组在术后第3天、第7天和第10天分设三个时相点将大鼠处死,每个时相点8只,通过下腔静脉留取血液2-3ml及肝脏组织,检测血清胆红素(TBil,DBil)和转氨酶(ALT,AST),观察肝脏病理形态学改变,TUNEL法测定肝细胞凋亡及免疫S-P法检测iNOS/NF-κB蛋白表达的情况。结果1.与SH组同时相点比较,BDL组大鼠血清中AST、ALT、TBIL、DBIL水平在术后第3d、7d、10d天均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01)。与BDL组比较,PGE1组大鼠血清肝功能在术后第3天TBil、DBil水平无统计学意义,而ALT、AST的差异具有统计学意义(P<0.05);在术后第7d及第10d大鼠血清中AST、ALT、TBIL、DBIL水平差异均具有统计学意义(P<0.05)。2.与SH组同时相点比较,BDL组大鼠肝细胞的凋亡指数明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01),并且随胆总管结扎天数的延长凋亡愈明显;与BDL组同时相点相比,PGE1组大鼠肝细胞的凋亡指数较之明显减少,差异具有统计学意义(P<0.01)。3. SH组大鼠在术后的肝细胞形态方面改变不显著,BDL组大鼠肝细胞均见不同程度的细胞内和/或细胞间胆汁淤积,炎性细胞浸润、胆小管扩张及细胞凋亡,且随时间的延长愈来愈明显,而PGE1组大鼠在同时相点肝细胞的形态改变程度较BDL组明显减轻。4.与SH组同时相点比较,BDL组大鼠肝组织中iNOS/NF-κB的表达均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);与BDL组同时相点比较,PGE1组大鼠肝组织iNOS的表达较低,NF-κB的表达较高,两者差异均具有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论1.大鼠胆总管结扎致胆汁淤积后,可引起肝功能明显损伤,肝细胞凋亡明显增加。2.前列腺素E1可以明显改善阻塞性黄疸大鼠的肝损伤程度,明显减轻阻塞性黄疸所致的大鼠肝细胞凋亡;3.前列腺素E1可能是通过直接或间接下调促凋亡蛋白iNOS、上调抗凋亡蛋白NF-κB表达,从而减轻阻塞性黄疸大鼠的肝细胞凋亡。
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