背景:哈夫病是因进食淡水、海水水产品导致的不明原因横纹肌溶解综合征(Rhabdomyolysis,RM),研究表明,我国哈夫病多由进食小龙虾引起,自2010年至今,每年夏季均有病例发生,其中以2016年病例最多,引起了广泛的社会关注。但迄今为止,哈夫病的病因尚不明确,我国缺乏对小龙虾引起的哈夫病的流行病学特征、影响因素的系统研究,动物实验研究也未获得明确的病因学线索,实验室检测开展困难。目的:本研究通过对既往病例的回顾及2019年新发小龙虾相关RM病例的流行病学调查,总结流行病学特征和影响因素,完善我国的流行病学资料。用已知致RM物质探索实验动物RM发生情况,筛选与小龙虾相关RM致病特点和临床表现相似的动物。利用新发病例可疑食物溯源调查采集的样本进行动物实验,筛选含致病因子的问题样本。初步建立动物模型实验筛选可疑食物样本的方法。方法:进行哈夫病病例的文献系统性研究,选取RM高发省份的地市,采用统一的流行病学资料调查表收集病例信息,开展描述流行病学研究,阐明该病的健康危害和流行特征。结合既往的调查研究及病因假设,收集同餐进食情况、小龙虾暴露史、野外捕获点等相关危险因素信息,开展病例对照研究,发现该病的影响因素。利用已知的可引起人类横纹肌溶解综合征的药物,选择不同品种和品系的实验动物,进行动物实验,筛选出与人类哈夫病致病特点和临床表现相似的动物。采集与病例有流行病学相关性的小龙虾样本,开展动物实验研究,并开展一般观察、血生化试验、骨骼肌组织病理学检查,筛选可能含致病因子的样本。结果:(1)文献报道的哈夫病病例中小龙虾相关病例1606个,其他水产品相关188个。小龙虾相关RM病例于每年7月、8月发生于我国长江流域城市,以年轻女性高发。其他水产品相关病例的流行无明显季节特征和人群分布特点。2019年7月1日至2019年8月23日,湖北省武汉市、安徽省马鞍山市共发生小龙虾相关横纹肌溶解综合征病例45例,其中确诊病例32例,可能病例5例,疑似病例8例。肌肉酸痛(n=45,100.00%)、肌肉无力(n=31,68.89%)和胸闷(n=23,51.11%)是最常见的症状。实验室检查肌酸激酶升高,最高达17432U/L。大部分病例年龄在20-50岁之间,女性病例稍多于男性病例。病例最后一次食用小龙虾与出现肌肉酸痛等症状的时间间隔为8h(范围2h-15h)。平均进食数量为16只(500g),主要进食虾肉(91.09%)、虾黄(86.67%)。对病例及同餐未发病者组成的对照调查发现,病例组与对照组进食小龙虾的数量(OR=1.23(1.07,1.40))和是否进食虾黄(OR=18.24(2.80,118.87))之间的差异有统计学意义。(2)辛伐他汀、吉非罗齐连续联合给药10天后Wistar大鼠血清肌酸激酶、天冬氨酸氨基转移酶、谷氨酸-丙酮酸转氨酶升高,与给药前及对照组对比差异有统计学意义(P<0.05),个别大鼠肌肉组织病理检查显示肌纤维坏死。ICR小鼠在辛伐他汀、吉非罗齐联合给药或单独给药后,各生化指标与对照组及给药前相比无统计学差异。Wistar大鼠可作为下一步进行小龙虾相关RM动物实验的动物。将病例(病例流调编号:420103-001-1)溯源调查采集的小龙虾样本,分成虾肉、虾黄、虾鳃三个部分,一部分煮熟给予Wistar大鼠,一部分直接给予大鼠。持续给予小龙虾生虾肉与熟虾肉,第5天、第10天测量大鼠血清肌酸激酶、天冬氨酸氨基转移酶均有所升高,且大鼠活动度均有所降低,精神较差。持续给予小龙虾生虾黄、熟虾黄,第5天测量大鼠血清肌酸激酶、天冬氨酸氨基转移酶升高。提示这批小龙虾样本中可能含有致RM的因子,该因子主要存在于虾肉与虾黄中,在每只虾中含量可能不同,在虾黄与虾肉中含量可能不同,具有脂溶性、热稳定性的特征。结论:小龙虾相关RM每年7月、8月在我国长江流域城市流行,病例多集中在20岁-50岁的年龄范围,女性比例稍高于男性,进食数量多、食用虾黄是可能的危险因素;Wistar大鼠在辛伐他汀、吉非罗齐联合给药后可以发生RM,可用于进行哈夫病动物实验研究;与病例相关的小龙虾样本导致了大鼠发生RM,虾肉、虾黄可能含有致RM的危害物,该危害物具有热稳定性。在病因不明、检测方向不明的情况下,可参考本实验方法筛选可能含有致病物质的小龙虾样本。