目的:探讨应用RNAi技术沉默信号转导子与转录活化子3(Stat3)基因抗Lewis肺癌细胞效果。方法:①以Stat3己知序列为靶点,构建能够稳定表达Stat3 siRNA的pSilencerTMneo 3.1-H1-Stat3 siRNA重组质粒;②应用真核细胞转染技术转染Lewis肺癌细胞株,研究重组质粒转染Lewis肺癌细胞后Stat3的表达状况及对细胞凋亡的影响。③复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌皮下移植瘤模型及小鼠肺转移瘤模型,应用电转染技术将重组质粒带入瘤体内观察抑瘤作用及抑制肺转移作用。结果:①成功构建pSilencerTMneo 3.1-H1-Stat3 siRNA重组质粒,并经基因测序证实;②重组质粒转染Lewis肺癌细胞后,Western blot和RT-PCR结果证实Stat3表达受到明显抑制,流式细胞仪检测、Annexin V-CY3凋亡试剂盒、总DNA凋亡梯带(DNA ladder)及MTT实验结果提示细胞出现凋亡,生长明显受到抑制。③体内研究结果显示pSilencerTMneo 3.1-H1-Stat3 siRNA组肿瘤生长明显受到抑制,凋亡的原位酶标记检测显示瘤块中心出现细胞坏死以及核固缩等细胞凋亡征象,Western blot及RT-PCR提示,pSilencerTMneo 3.1-H1-Stat3 siRNA重组质粒体内转染Lewis肺癌细胞后Stat3的表达在蛋白水平与mRNA水平上都明显下调,同时,进一步通过免疫组化及Western blot显示pSilencerTMneo 3.1-H1-Stat3 siRNA重组质粒可能通过阻断Stat3信号直接下调MMP-2及VEGF的表达,从而抑制肿瘤在C57BL/6小鼠体内侵袭及转移。结论:应用RNAi技术沉默Stat3基因可以降低肺癌细胞中Stat3的表达,导致细胞凋亡,抑制肿瘤的生长、侵袭及转移。