木素过氧化物酶的逆胶束纯化研究

来源 :湖南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bingling1054
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
木质素是一种广泛存在于自然界中的有机高分子化合物,其降解已成为地球上碳素循环的限速步骤。木素过氧化物酶(lignin peroxidase,LiP)是木质素降解过程中起关键作用的酶。一直以来,木素过氧化物酶的提纯方法主要是盐析沉淀,但是效果不明显。逆胶束萃取技术是一种新型的生物分离纯化技术,它具有操作简单、成本低、萃取效率高、萃取条件温和和对环境无二次污染等优点,已逐步被应用于酶的分离及纯化。本研究分三个部分对木素过氧化物酶的生产及纯化进行了研究。第一部分是对黄孢原毛平革菌产木素过氧化物酶的发酵条件进行优化研究,考察了方案一和方案二中初始pH值及装液量对产酶量的影响。研究结果表明:初始pH值为4.5时,产酶量最高。随着装液量的增多,木素过氧化物酶的酶活不断增大。在方案一和方案二中,分别在装液量为100mL、60mL时产酶量达到最大值。在最优培养条件下,两种方案中木素过氧化物酶的酶活分别为0.120U/mL及0.110U/mL,前者较后者占优势。第二部分主要研究逆胶束体系萃取木素过氧化物酶的前萃过程中离子种类及浓度、表面活性剂浓度、水相pH值及振荡时间对萃取效率的影响。研究显示,在鼠李糖脂(RL)构建的逆胶束中,阳离子K~+对萃取率的影响大于Na~+。通过实验得出最佳前萃条件为:RL及KCl的浓度为2.75mmol/L、0.04mol/L,pH值为3.0,振荡时间为30min。在该条件下,LiP酶活回收率为93%,纯化倍数为2.9。第三部分主要研究逆胶束体系萃取木素过氧化物酶的后萃过程中离子浓度、水相pH值及乙醇加量对萃取效率的影响。通过研究发现后萃过程中加入乙醇可提高酶活回收率及纯化倍数,使萃取之后更加容易分相。通过实验得出最佳后萃条件为:KCl的浓度为0.5mol/L,pH值为6.0,乙醇加量为8%,在该条件下,纯化倍数为3.2。SDS-PAGE电泳分析结果进一步证实了木素过氧化物酶的纯化效果较好。
其他文献
专业合作经济组织作为一种农民自发性的组织创新模式,以产业链条为纽带,以经济合约为基础,在带动农户走向市场的同时,增强了单个农户在金融交易中的市场势力。专业合作经济组
现代产业的发展必然会推动经济增长和人才需求结构的变化,而这一变化在一定程度上依赖于学科专业结构的设置。这就要求各高校根据本区域的产业结构调整学科专业结构,以优化学
网络给人们提供便捷的同时,也给影视作品的著作权带来严峻挑战,信息网络传播权作为其组成部分,很容易受到视频网站中各方当事人的侵犯,其中主要一方就是视频网站自身的行为。
湖州的是世界丝绸之源,丝绸文化源远流长,但近代以来却出现了没落的趋势。这揭示了在传统丝织业走弱的环境中,丝绸文化才是复兴湖州丝绸的钥匙。通过实地调查可以发现,在融通
本研究以应用广泛的AAO工艺为基础而开发的一种实用新型除磷脱氮工艺BBSNP(Bio-Bi-Selector Nitrogen and Phosphorus removal process)为基准在低温下初步探索和讨论了传统除
传统的班级管理重个体轻整体,忽视学生团结合作精神的培养。以团队建设为核心的班级管理模式,最大限度地将团队利益与个人利益糅合在一起,提高了管理效能。在实施中,要尽可能
目的测量不同时期母乳中壳三糖酶的活性,确定在早产儿和足月儿母亲的母乳中壳三糖酶的活性是否不同,以探讨其在帮助早产儿抵御真菌感染中的作用。方法哺乳期妇女分早产和足月
目前,有许多建筑物和构筑物因砼施工质量问题而留下隐患。有的工程在建时就进行处理补强,有的工程竣工后影响使用,还有的甚至倒塌。作者通过六年来监督监督工作实践,结合现行《混
<正>北纬22°孕育滨海的神奇纬度打开世界旅游地图,夏威夷、加勒比海、戛纳、迈阿密、维多利亚港……一个个因为大海、阳光、沙滩而璀璨浪漫的名字跃然纸上。我们发现,世界级
分析了三相五柱式消弧线圈的工作原理和单相接地故障时各线路零序测量导纳的特征;结合该消弧线圈的补偿控制特点,提出了针对稳态接地故障的零序导纳增量最大值的接地选线方法