本实验以湖羊为研究对象,利用基因克隆技术克隆绵羊YAP1基因cDNA全长序列,并利用生物学分析软件对绵羊YAP1基因与其他物种的同源性,其蛋白的理化性质,二级结构和三级结构进行了生物信息学分析；利用荧光定量PCR技术对绵羊YAP1基因在出生后二日龄,二月龄和六月龄不同公母在四种不同骨骼肌(背最长肌、比目鱼肌、腓肠肌、趾长伸肌)的相对表达进行了分析；并利用RT-PCR、载体构建和定点突变技术,构建了pEGFP-C1-YAP1,及其磷酸化位点突变体pEGFP-C1-YAP1S42A真核表达载体。旨在探索YAP1在绵羊出生前和出生后肌肉生长过程中的调控机制,为湖羊肌肉生长性状的选育提供遗传学资料。本研究获得了一下结果：1.克隆获得绵羊YAP1基因序列全长为1712bp,其中包括编码区1212bp,5’UTR27bp和3’UTR473bp,共编码403个氨基酸。同源性分析发现,绵羊YAP1核苷酸序列与推测的氨基酸序列与灰仓鼠的同源性最高,分别达到78.77%和92.51%,而与人、黑猩猩的一致性差异较小。氨基酸序列分析得到,绵羊YAP1基因编码蛋白为水溶性蛋白,相对分子量为44079.0Da,理论等电点为4.91,无信号肽序列和跨膜区；亚细胞定位主要在细胞核,不属于分泌蛋白；预测含有33个磷酸化位点,7个糖基化位点,具有两个WW结构域,二级结构以无规则卷曲为主,三级结构显示,YAP1结构域区构成弯曲状螺旋结构。预测YAP1蛋白主要在调节功能过程中有着关键作用。2.绵羊YAP1基因在不同肌肉中的表达存在显著差异,其中在腓肠肌中相对表达最高,在背最长肌中最低,在不同生长阶段(二日龄、二月龄和六月龄)的比较中,YAP1的表达随月龄的增加而升高。YAP1在公母间表达的差异不显著。YAP1与肌球蛋白重链(MyHC Ⅰ、ⅡA, ⅡX)、 MSTN、MyoG的表达关联性分析表明,YAP1与MyHC Ⅰ呈极显著负相关,与MyHCⅡX、MSTN、MyoG呈极显著正相关,揭示YAP1与出生后肌纤维的发育有关联,可能参与了肌球蛋白重链基因的相互转化,并可能成为调节肌肉生长的候选基因。3.重组质粒pEGFP-C1-YAP1经PCR、酶切、测序鉴定,证实YAP1基因CDS区已正确克隆入pEGFP-C1表达载体；经测序鉴定,YAP1第42位丝氨酸成功突变为丙氨酸。本研究为探索YAP1在成肌细胞增殖和分化过程中的调节机制奠定了实验基础。