TGF-β1和E-cd在声门上喉鳞癌的表达及与转移、预后的关系

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前言 转化生长因子(Transforming growth factor-β,TGF-β)家族是一类属结构相关蛋白的异二聚体多肽,目前已从哺乳类细胞中分离出3种类型的同源异构体,即TGF-β(1、2、3)均有类似的生物学活性。其中TGF-β1是人体内的主要形式,它可影响细胞的生长、分化、粘附、迁移、血管和细胞外基质的形成及免疫功能。研究表明高活化、高表达的TGF-β1与肿瘤的淋巴结转移有关。上皮钙粘附素(E-cadherin,E-cd)是一种钙依赖性细胞粘附分子,存在于正常上皮细胞中介导细胞之间的同型粘附,在组织结构的形成和维持中扮演着关键角色。研究表明,多种恶性肿瘤中E-cd表达的减少或缺失与癌细胞易发生浸润和转移有关。基于以上的理论基础,我们应用SABC免疫酶标记技术,以94~96年间60例声门上型喉鳞癌(Supraglottic larynx squamous cell carcinoma,SGLSCC)术后存档蜡块标本作研究对象,通过对TGF-β1和E-cd在SGLSCC中的表达及与其生物学行为关系的分析,研究它们对颈部淋巴结转移、预后的诊断价值。 实验材料 收集中国医科大学第一附属医院耳鼻喉科1994~1996年期间手术切除的60例SGLSCC的存档蜡块标本,另取正常喉粘膜蜡块标本10例作为对照组。其中,男性37例,女性23例,年龄在36~79岁之间,平均58.1岁。所有病例术后均随访5年以上,其中术后1年内死亡者9例,1~5年内死亡者20例,生存5年以上者25例,失访6例。按照1987年国际抗癌协会联盟(UICC)的标准,临床分期:I期3例,n期13例,111期21例,W期23例;病理分级:I级(高分化)18例,n级(中分化)18例,111级(低分化)24例。根据有无颈部淋巴结转移分为有转移34例、无转移26例。根据患者性别、年龄及肿瘤大小各分为两组。实验方法 试剂与方法:一抗TGF一日1(v)兔抗人多克隆抗体,为美国Santa Cmz公司产品;E一cd兔抗人多克隆抗体、SABC试剂盒、DAB显色试剂盒均为Boster公司产品,以上试剂均为即用型。采用SABC免疫酶组织化学染色法。用PBS代替一抗作阴性对照,用已知阳性片作阳性对照,所有对照均与实验标本在同样条件下进行染色。 统计学方法:采用SPSS 10 .0统计软件包,进行卡方分析、Kendall急等级相关分析及K叩 lan一Meier分析。实验结果 ①60例声门上型喉鳞癌中TGF一p:和E一cd的阳性表达率分别为81.7%(49/60)和70.0%(42/60),10例正常喉粘膜中TGF一p,和E一cd的阳性表达率分别为20.0%(2/10)和90.0%(9/10);②TGF一p,和E一cd在淋巴结、病理分级及临床分期三项各组间的表达分别呈正、负相关关系,此等级相关关系有统计学意义(P<0.0001);③两指标在有、无淋巴结转移组间的表达差异具有显著的统计学意义(P<0.0001),而在患者的年龄、性别及肿瘤大小组间的表达差异无统计学意义(P>0.05);④两指标间经统计学分析无一致性(KapPa二一0 .198,p二0 .077)即无共表达关系;但对两指标的等级数据作Kendall‘s等级相关分析(r二一0.726,p二0·0001),揭示TGF一p;与E一ed在SG此CC的表达中呈明显的负相关关系,即TGF一p;的高表达往往伴有E一cd的表达降低,反之亦然;⑤E一cd表达情况与生存率曲线间有显著的统计学意义,即E一cd阳性表达者5年生存率大于E一cd阴性表达者,而TGF一p;的表达情况与生存率曲线间无明显的统计学意义。讨论 癌是一种慢性、进展性疾病,被定义为对细胞生长、分化和维持组织完整性的障碍或失调,而维持组织完整性的障碍则导致了对邻近及远处组织的侵袭和转移。而且癌症的浸润、转移等恶性表现型是决定病人的临床病程及预后的两个最重要的因素。但目前临床现有的检查技术尚不能对此进行准确评估。故我们采用免疫组化SABC法对TGF一p;和E一cd在SGLSCC中的表达及与其生物学行为的关系进行研究,探讨两者在SG玲 CC早期颈淋巴结转移中的表达意义。 1.TGF一pl的表达在SG玲CC中的研究 TGF一p:是具有广泛功能的多肤类细胞内源性生长抑制因子,对正常上皮细胞发挥着普遍的生长抑制效应。但近年来Akhurst等研究证实,TGF一p对肿瘤有正、负两方面的影响,早期是肿瘤的抑制者,但在后期却是肿瘤侵袭的刺激者。同时许多人类肿瘤都过度表达TGF一p,,且可刺激肿瘤而迅速发生浸润、转移。本研究结果显示,正常喉粘膜组TGF一p;表达的阳性率为20.0%,在sGIscc中无淋巴结转移及有淋巴结转移组的阳性率分别为69.2%、91.2%,三组间的TCF一pl的表达差异有显著的统计学意义(P<0 .0001),且三组间存在着正相关关系,并具有统计学意义(P<0.0001);特别是淋巴结的有转移与无转移组间比较差异更具显著的统计学意义(p<0 .0001);在病理分级项中皿级与I级比较差异有显著的统计学意义(P<0.《XX)1)。由此提示,TcF一p,的高表达与SG“CC发生淋巴结转移、组织低分化有密切关系,并反映出TGF一p,的高表达促进SG比CC发生恶性表现,并加速肿瘤的浸润和转移。这一结果与H铭edomH等的研究结果相吻合。还有研究表明,细胞在逐步地向恶性转变的最后阶段都对TGF一日;的生?
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