成都市售常见水产品中副溶血性弧菌的污染情况、耐药性及MLST分型研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:loughtjiang
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副溶血性弧菌是引起我国水产品相关感染性腹泻的主要原因之一。随着人们对日常膳食中营养要求的改变,水产品成为消费者补充优质蛋白的主要选择之一。近些年由于抗菌药物在水产养殖以及医疗行业的广泛运用,使得副溶血性弧菌的耐药性增加,对食品安全的把控无疑是较大的挑战。本研究旨在调查成都市水产品中副溶血性弧菌的污染及耐药状况,并对其毒力基因的携带情况进行检测,采用多位点序列分型分析其遗传多样性,主要结果如下:1.2018年10月至2019年10月,采集各类水产品共590份,主要包括文蛤、花蛤、蛏子、青蟹、对虾、小龙虾、美蛙、鳝鱼。按照GB4789.7-2013进行样品处理、纯培养及部分生化试验,并结合16S rDNA测序完成副溶血性弧菌的分离鉴定。结果显示,590份样品总体污染率为26.9%,海产品中总体污染率为30.1%,未从淡水产品中分离出可培养副溶血性弧菌。对虾、蛏子、花蛤、文蛤、青蟹的污染率分别为45.2%、35.2%、11.4%、20.5%、42.9%。一年四季中夏季分离率最高为42.0%。159株副溶血性弧菌共产生了9种O抗原血清群类型,优势O抗原血清群为O1型(42.1%)、O4型(16.3%)、O3型(15.1%)。由于种类、采集季节、采集地点,O抗原血清群分型存在差异。2.采用纸片扩散法对159株副溶血性弧菌分离株进行检测,共测试13种抗菌药物。结果显示,分离株对氨苄西林的耐药情况最高(92.4%),其次是阿莫西林(65.4%),对头孢噻吩、头孢呋辛的耐药率相对比较低,分别为23.3%、18.2%。大多数分离株对复方新诺明、四环素、阿米卡星、头孢唑啉、头孢吡肟敏感,耐药菌株占比为4.4%、7.5%、6.9%、8.8%、9.4%。所有分离株均对氯霉素、庆大霉素、环丙沙星、氧氟沙星敏感。4.40%的菌株不具有耐药性,7.5%的分离株为多重耐药菌株。所有分离株共产生25种耐药谱型,耐药情况显著。3.采用普通PCR方法扩增分离株中3种溶血毒素相关基因。结果表明,分离株中tdh和trh2种毒力基因的携带率为4.4%、11.9%,其中1.9%的分离株同时携带2种毒力基因,共3株,来自对虾和文蛤。tlh基因检出率为100.0%。4.采用PCR方法对副溶血性弧菌7个管家基因进行扩增,并电泳检测其产物,最后将产物纯化后测序。所有分离株有20株未成功匹配,其余菌株分为72个ST型,其中ST1801(8.2%),ST392(7.5%),ST124(6.3%)分离率较高。72个ST型包括72个单体,无大流行克隆群出现。不同种类、不同采集季节的优势ST型不同,相同ST型分离株耐药情况存在差异。综上所述,本论文调查了成都市区内常见水产品中副溶血性弧菌的污染情况,并从水产品种类、季节等方面进行系统分析,主要包括污染率、耐药性、毒力基因分布等方面。从食品安全角度,该试验结果可为其引起的食源性疾病防控提供基础数据支持,同时可为该种细菌的传播及溯源调查提供一定的科学依据,为研究副溶血性弧菌的传播及该类食品安全风险评估提供基础数据。
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