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近五十年来，超低温保存种质细胞技术已经趋于成熟，特别是近几年对海洋动物种质细胞的研究力度也开始逐渐加大。本研究结合国家高技术研究发展计划(863计划)中“重要海水养殖鱼类配子和胚胎的低温保存技术及其种子库的建立”课题研究项目，进行了大黄鱼精子和胚胎超低温保存实验，得到了他们在液氮(-196℃)条件下的适宜保存条件。 在大黄鱼精子超低温保存实验中，逐个筛选了方案中各个因素的最佳水平。实验筛选了二甲基亚砜(DMSO)、乙二醇(EG)、甘油(GLY)、丙二醇(PG)和甲醇(METH)五种抗冻剂配合X1—X5五种稀释液和三种添加剂的冷冻效果，发现X5+Gly10％+海藻糖0.015g／ml的抗冻溶液效果最好，可获得冻精复活率，授精率和孵化率分别为92％，48.8％和51％。本实验就降温过程筛选了程序降温法，分步投氮法和其二者相结合的方法，就复温过程筛选了28℃、43℃和70℃水浴解冻的各种方法。其中在液氮罐内-15℃位置停留10min后再在液氮面停留5min，然后投氮的两步投氮快速冷冻法加上43℃水浴解冻至完全融解效果最好，能达到85.3％的冻精复活率。而且这是操作最简单、历时最短的冷冻方法，适合生产现场应用。当稀释比为1：3时，不同样品体积对精子冷冻效果区别不大；当冻积为0.5ml时，精子稀释比1：3时冷冻效果最好。实验还用到精子动(静)态图像分析系统分析冻精活力情况，测出最佳冷冻方案冻精活动率为93.75％，其中快速向前运动的占50.0％。 在大黄鱼胚胎超低温保存实验中，逐个筛选了方案中各个因素的最佳水平。实验筛选了DMSO、GLY、PG和METH四种抗冻剂配合稀释液和添加剂的冷冻效果，抗冻剂METH对胚胎的毒性最小而GLY毒性最大，胚胎在20%METH中平衡40分钟仍可保持81.8%的复活率，而在20%GLY中6分钟复活率就低于80%。且METH能使胚胎经超低温保存后保持形态最完整，能达到60%的形态完整率，而使心跳期胚胎经超低温保存后形态受损最严重的是PG，胚体大多数发白且成粉碎状。大黄鱼胚胎的超低温保存的最适抗冻液为X3+20%METH，0.159/ml乙酞胺能部分降低METH毒性，而METH10%+GLY10%能提高冷冻效果。一30℃为大黄鱼心跳期胚胎超低温保存的危险下限温度，从一30℃降到一40℃胚胎复活率从40一80%降为趋向于。。大黄鱼胚胎的超低温保存的最适降温方法为:一5℃·min一‘O℃---------一--一今一30℃(lmin)一30oC·min一‘一一一一一一一一一一一一一一令一180℃今NZ 最适复温方法为一80℃(Zmin)一舰3℃水浴解冻至融解1/2，再移到室温解冻到完全融解，最适洗脱方法为在0.5M蔗糖溶液中洗脱10分钟后移入海水孵化。在一26℃对样品植冰可提高胚胎超低温冷冻后的形态完整率46.8%。三者配合虽然没有得到复活胚胎，但能得到84.8%胚体、卵膜、卵黄囊和油球等形态都基本正常的胚胎。