β-防御素是近年来发现的具有数十个氨基酸组成的阳离子小肽，具有广谱抗微生物活性。本论文使用基因工程方法重组表达可溶性小鼠β-防御素-9。采用大肠杆菌原核表达系统，建立了从获得基因、载体构建到表达优化及放大，直至产物分离、多克隆抗体制备整套技术体系。主要的方法与研究结果如下：　　 1.本文利用进行了密码子优化的β-防御素-9表达菌种BL21（DE3）/pET-32a（+）-rDefb9，考虑诱导温度、诱导剂量、诱导时机、表达时机等因素，进行摇瓶发酵条件优化。获得优化培养条件为：诱导温度为28℃，IPTG量为0.8 mmol·L-1，诱导时机为对数生长期中期，诱导后表达3h终止。　　 2.对所得重组小鼠β-防御素-9（rDefb9）的分离工艺进行了探索，经过了Ni离子亲和层析，甲酸裂解融合蛋白等一系列处理，得到了纯度较高的成熟的重组rDefb-9。　　 3.采用纯化的原核表达重组蛋白免疫家兔，制备rDefb-9的多克隆抗体，然后以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测抗体的效价，为进一步研究rDefb-9基因的功能奠定了基础。