宿主细胞ESCRT-I复合体在杆状病毒AcMNPV出芽病毒粒子侵染中的作用

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在真核细胞中,内吞体分选转运复合体(Endosomal sorting complex required fortransport,ESCRT)由ESCRT-0,I, II, III,和Vps4五个复合体组成,主要负责识别和分选泛素化修饰的膜蛋白,参与多泡体(Multivesicular bodies,MVBs)的形成、自体吞噬和胞质分裂等过程。此外,ESCRT系统也参与一些囊膜病毒的入侵和出芽释放过程。杆状病毒是一种双链DNA囊膜病毒,该类病毒可作为安全的生物杀虫剂、外源基因表达与展示载体、以及哺乳动物细胞基因转导载体。最近的研究发现,宿主细胞ESCRT系统与杆状病毒侵染密切相关,表达ESCRT系统关键性调节蛋白Vps4的显性-负性突变体能显著抑制苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒(Autographa californica multiplenucleopolyhedrovirus, AcMNPV)出芽病毒粒子的入侵和出芽释放,但其详细机理尚不清楚。本论文选择ESCRT-I作为研究对象,通过RT-PCR和3’RACE方法从草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞Sf9中克隆获得了ESCRT-I组成基因Tsg101,Vps28,Vps37A和Vps37B。双分子荧光互补实验发现,Tsg101与Vps28能相互作用。随后的病毒感染性补偿实验结果表明,过表达Tsg101或其缺失不同结构域的突变体均显著影响AcMNPV感染性出芽病毒粒子的产生。关于ESCRT-I在AcMNPV侵染中的作用仍在进一步研究中。
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