目的:研究自噬/溶酶体途径在NMDA受体介导的神经兴奋性毒性中的作用。 方法:采用脑立体定位纹状体内给药法建立NMDA受体介导的大鼠神经兴奋性毒性模型,透射电镜观察纹状体神经元中自噬体形成和溶酶体激活,免疫组化法检测纹状体内溶酶体相关膜蛋白Lamp-1和组织蛋白酶cathcpsin B的表达,Western Blot检测cathcpsin B、eathcpsin D、Bc1-2及caspase-3的蛋白水平,DNA ladder法及尼氏染色法观察自噬体抑制剂3-MA和溶酶体抑制剂cathcpsin B inhibitor对模型大鼠纹状体神经元的保护作用。 结果:透射电镜显示大鼠纹状体喹啉酸注射0.5小时后即可见自噬体,4小时后自噬体出现最明显,免疫组化显示喹啉酸可上调Lamp-1的表达并呈时间相关趋势,cathcpsin B表达增多。Western Blot结果显示模型大鼠纹状体cathcpsin B和cathcpsin D激活,caspase-3酶原条带减弱,Bcl-2蛋白在注射喹啉酸后8小时表达增加,12小时表达下调。3-MA和cathcpsin B inhibitor给药组与模型组相比DNA ladder凋亡条带明显减弱,损伤面积显著减小(P<0.01)。 结论:NMDA受体介导的神经兴奋性毒性可能与自噬和溶酶体的激活有关,自噬体抑制剂和溶酶体抑制剂对喹啉酸所致的大鼠纹状体神经元损伤有保护作用。