基于氧化钽纳米颗粒封包荧光激发蛋白的活体肿瘤成像研究

来源 :湖南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:FANSHENGHUA2009
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活体荧光成像以其操作简便、成像迅速、无放射性危害等优势在许多研究领域已被科研工作者广泛的应用。特别是,各种基于荧光的探针能够通过组织进行灵敏性好且特异性的成像,极大程度地推进了临床相关方面的研究。然而,传统荧光探针的递送和信号穿透问题对其性能提出了新的要求。本论文中,我们使用空心氧化钽(TaOx)纳米颗粒包裹荧光激活蛋白(FAP),用于肿瘤细胞的体内成像。我们发现,TaOx外壳可以保护荧光素/FAP复合物免受光漂白,显著提高其光稳定性。此外,纳米壳还为内含的蛋白质提供了天然保护层,使其免受普通生物降解的影响。我们相信这种封闭和传递荧光生物分子的策略将是一个有吸引力的生物成像方法。本论文的工作主要包括以下两个内容:1、TaOx@FAPd L 5**纳米颗粒的制备、材料学表征及其性能研究本文采用一步合成法制备得到中空TaOx纳米颗粒,然后用聚乙二醇(PEG)对其进行修饰以获得良好的生理稳定性。TaOx@FAPd L 5**纳米颗粒与TaOx纳米颗粒的合成步骤基本一致,只需将去离子水替换为荧光激发蛋白FAPd L 5**即可。得到TaOx@FAPd L 5**纳米颗粒后,利用透射电子显微镜(TEM)和颗粒粒度分析仪对纳米颗粒的电镜及粒径进行表征。为了可以进一步优化其荧光成像的效果以及提高荧光成像的稳定性,利用中空的TaOx纳米结构,将MG/FAPd L 5**包裹在其中,对其起到保护作用。本文先后探究了TaOx@MG/FAPd L5**的光稳定性以及抗酶解性。结果表明,TaOx@MG/FAPd L 5**较MG/FAPd L 5**而言,光稳定性以及抗酶解性更优秀。2、基于TaOx@FAPd L 5**纳米颗粒的细胞以及活体成像研究在多维活细胞成像系统中考察MCF-7细胞对TaOx@MG/FAPd L5**、TaOx+FAPd L5**以及FAPd L 5**的吞噬和在细胞内的分布情况,其结果表明,该纳米颗粒可以进入MCF-7细胞且主要分布在细胞溶酶体内。在此基础上,将TaOx@FAPd L5**纳米颗粒和FAPd L 5**分别尾静脉注射入裸鼠体内,24 h后再将MG原位瘤内注射,观察其用于活体荧光成像中的研究的可行性,随后将小鼠解剖,进一步验证活体成像实验的准确性并考察TaOx@FAPd L 5**纳米颗粒是否对小鼠造成了组织炎症反应。活体荧光成像结果显示,肿瘤处产生强荧光信号,器官成像图表明该纳米颗粒大部分均在肿瘤处富集,肝及肾的纳米颗粒含量很少,且H&E染色结果也证实了该纳米颗粒对组织不会引起炎症反应。
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