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小球藻因营养丰富、全面、均衡、无毒,含多种具有重要生理功能的成分,在多个领域得到了广泛应用。异养培养比光合自养优势明显,是当前研究的热点之一。异养培养小球藻,藻密度大幅度提高,周期缩短,分离费用降低,如果采用流加等操作方式,可实现高密度培养,将推动小球藻的应用与开发。本文对小球藻的异养培养进行了较系统的研究,小球藻异养培养的中间试验获得成功,实现了小球藻的高密度培养,为大规模工厂化生产提供了有力依据。 1.小球藻异养培养的培养基和生长条件优化表明,(1) C源与N源分别以用葡萄糖和D-果糖及KNO3和NH4NO3为好;Gly可作为唯一N源供小球藻生长,对藻的异养生长有显著促进作用,BSA也表现促进效应;(2) 培养基中起始添加10g.L-1葡萄糖和1.6g.L-1KNO3较适宜,流加培养时葡萄糖和NO3-浓度应分别控制在2.45~6.17g.L-1和≤0.44g.L-1范围内,补料液中最适C/N值为41.2;(3) 小球藻对PO43-吸收量少;(4) 接种量要大些,最适起始pH为6.5。 2.植物激素在小球藻异养培养中起到非常重要的调节作用。IAA、IBA、6-BA、(+)ABA及IBA与6-BA的组合等植物激素及抗体PAbs-ABBPs均能显著促进小球藻的异养生长:IBA与6-BA的组合抑制藻对糖的吸收,促进藻吸收NO3-。 3.La3+、CC及PS也影响着小球藻的异养生长。La3+和CC均能促进小球藻的异养生长和藻对葡萄糖的吸收,PS则与之相反,生长抑制率达52.6%;La3+加速培养后期藻对NO3-的吸收,CC和PS则能稍微抑制藻吸收NO3-;La3+还能显著提高异养小球藻的叶绿素含量。 4.摇瓶流加异养培养小球藻时,消泡剂能促进小球藻的异养生长和小球藻吸收葡萄糖,培养前中期消泡剂抑制NO3-的吸收,但后期加速藻吸收NO3-;PS及IBA与6-BA的组合均保持摇瓶分批培养的生理效应,消泡剂与它们有一定的相互作用。 5.用生物反应器流加异养培养高密度小球藻获得成功。5L生物反应器连续