【摘 要】
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目的:本实验以染矽尘大鼠模型为对象,以组织芯片技术为手段,旨在阐明染矽尘大鼠早期TGF-β的表达及其对Ⅰ、Ⅲ型胶原的调控.具体地讲,本实验主要探讨如下两个问题:1、染矽尘
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目的:本实验以染矽尘大鼠模型为对象,以组织芯片技术为手段,旨在阐明染矽尘大鼠早期TGF-β<,1>的表达及其对Ⅰ、Ⅲ型胶原的调控.具体地讲,本实验主要探讨如下两个问题:1、染矽尘大鼠不同时间点肺组织TGF-β<,1>表达的变化;2、染矽尘大鼠不同时间点肺组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化;3、染矽尘大鼠肺组织TGF-β<,1>对Ⅰ、Ⅲ型胶原的调控作用.方法:本实验采用清洁级Wistar大鼠96只,体重200-240克.随机将大鼠分为2组,即对照组和染矽尘组,每组48只.对照组大鼠气管内注入生理盐水,染矽尘组大鼠气管内注入矽尘混悬液.气管暴露法建立大鼠矽肺模型.对照组动物气管内注入1ml0.9％NaCl溶液,染矽尘组气管内注入浓度为50 mg/ml的矽尘混悬液1ml.模型建立后,每组分6个时间点(1d,3d,7d,14d,21d,28d)分别取8只大鼠将其处死.HE染色观察大鼠肺组织矽结节.天狼猩红染色法结合偏振光显微镜观察Ⅰ、Ⅲ型胶原及矽尘颗粒.用组织芯片仪制作组织芯片,用SP法检测组织芯片TGF-β<,1>的表达情况.对选定的视野用Nikon Eclipse E800偏振光显微镜观察,用WV-CP240/G Panasonic colour CCTV Camera摄像并存入计算机,然后用Image-Pro Plus Version 4.5 for windows图象分析系统进行定量分析.用Hue Intensity Saturation(HIS)颜色分割法选定阳性目标区域.用阳性区域的面积百分比代表胶原含量.用阳性细胞的积分光密度代表TGF-β<,1>蛋白表达量的多少.所有数值均用<->x±s表示,在不同时间点,两组间比较用t检验,以P<0.05作为显著性差异的水准.全部数据的统计学处理均采用SPSS11.5 for windows分析软件.
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