基于TLR-NF-κB通路对健脾升阳法治疗肺脾气虚型鼻鼽的机制研究

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目的探索健脾升阳法(和中止鼽方)对鼻鼽(肺脾气虚型)-变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者血清中IL-4(白细胞介素4)、IFN-γ(γ干扰素)及鼻黏膜组织中TLR4(Toll样受体4)、NF-κB(核因子κB)、NF-κB p50、NF-κB p65表达水平的影响,部分诠释中医健脾升阳法治疗鼻鼽(AR)的作用机制。方法采用前瞻性研究方法,按时间选取2017年11月至2018年11月在我院耳鼻咽喉科门诊就诊的肺脾气虚型鼻鼽患者15例为试验组,男8例,女7例,平均年龄37.20±12.39,并同期募集健康志愿者5例为健康对照组,男3例,女2例,平均年龄31.80±5.22。采集试验组治疗前及健康对照组外周血标本(抽取肘静脉血5ml离心后取上层血清)、鼻黏膜标本,并于-80℃冰箱保存。试验组口服中药和中止鼽方(由西南医科大学附属中医医院城北免煎中药房提供,免煎剂,每日一剂,每次1格,每日3次,开水冲服),4周为一个疗程,每周随访一次,记录患者临床症状、体征评分、有无不良反应等情况。健康对照组不服用任何药物。一个疗程治疗结束后再次采集试验组患者外周血标本(抽取肘静脉血5ml离心后取上层血清)、鼻黏膜标本,并于-80℃冰箱保存。采用ELISA技术检测试验组治疗前后及健康对照组血清中IL-4、IFN-γ的表达水平,RT-PCR技术检测试验组治疗前后及健康对照组鼻黏膜组织中TLR4、NF-κB表达水平,Western Blot技术检测试验组治疗前后及健康对照组鼻黏膜组织中TLR4、NF-κB p50、NF-κB p65的表达水平。整理所得实验数据,计量资料以均数±标准差(sx±)表示,运用SPSS22.0软件进行统计学分析,采用两独立样本t检验比较试验组治疗前后各项指标的差异,采用同法比较试验组治疗前与健康对照组各项指标的差异,P<0.05为差异有统计学意义。结果(1)试验组治疗前血清中IL-4的表达水平及鼻黏膜组织中TLR4、NF-κB、NF-κB p50的表达水平明显高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),(2)试验组治疗前血清中IFN-γ的表达水平明显低于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05),(3)试验组治疗后血清中IL-4的表达水平及鼻黏膜组织中TLR4、NF-κB、NF-κB p50的表达水平明显低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05),试验组治疗后血清中IFN-γ的表达水平明显高于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Th1/Th2细胞因子间的平衡失调是鼻鼽(AR)发生发展的关键,TLR-NF-κB信号通路与鼻鼽(AR)发病密切相关,和中止鼽方治疗鼻鼽肺脾气虚型患者,以健脾和中,升阳益气为法,通过抑制Th2细胞因子IL-4及TLR-NF-κB信号通路中TLR4、NF-κB、NF-κB p50的表达水平,上调Th1细胞因子IFN-γ的表达水平,纠正Th1/Th2细胞因子间的平衡失调。
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