加减地黄饮子对衰老小鼠海马WNT信号通路作用机制的研究

来源 :黑龙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mwchy362
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目的:观察加减地黄饮子对D-gal致衰老小鼠学习记忆能力、抗氧化能力、海马组织相关基因及蛋白表达的影响,探讨加减地黄饮子防治衰老的效果及作用机制。方法:1.雄性ICR小鼠105只(1月龄小鼠15只,7月龄小鼠90只)分为青年组、中年组、中年VE组、中年地黄组、衰老组、衰老VE组、衰老地黄组,共7组。除青年组是1月龄,其余各组均是7月龄。衰老组小鼠用1000mg·kg-1·d-1剂量的D-gal腹腔注射进行造模,每天注射一次,连续注射六周,造模期间小鼠正常进食进水。造模完成1天后开始灌胃VE和加减地黄饮子。VE组按照250mg·kg-1·d-1的剂量灌胃,加减地黄饮子组按照20.6g·kg-1·d-1的剂量灌胃,青年组、中年组和衰老组灌胃相应容积生理盐水,灌胃四周,之后进行Morris水迷宫实验,最后取材。2.利用 Real-time PCR 法检测海马 Wnt-3a、GSK-3 β、C-myc、TCF-4、β-catenin基因表达水平。3.利用 Western blot 法检测海马 Wnt-3a、GSK-3 β、C-myc、TCF-4、β-catenin蛋白表达水平。结果:1..Morris水迷宫定位航行实验结果显示:对小鼠连续几天的游泳训练,加减地黄饮子可使各组小鼠逃避潜伏期逐渐缩短;在空间探索实验中,加减地黄饮子能明显增加D-gal致衰老小鼠穿越安全平台区的次数,与衰老组小鼠相比有显著性差异(P<0.01)。2.海马组织基因表达:经Real-time PCR法检测示,加减地黄饮子在小鼠衰老的进程中可以上调D-gal致衰老小鼠海马Wnt-3a、TCF-4、β-catenin基因的表达,抑制GSK-3 β、C-myc基因的表达。3.海马组织蛋白表达:经Western blot法检测示,加减地黄饮子在小鼠衰老的进程中可以上调D-gal致衰老小鼠海马Wnt-3a、TCF-4、β-catenin蛋白的表达,抑制GSK-3 β、C-myc蛋白的表达。结论:1.加减地黄饮子能提高D-gal致衰老小鼠的认知能力。2.加减地黄饮子通过上调D-gal致衰老小鼠海马Wnt-3a、TCF-4、β-catenin基因及其蛋白的表达,下调GSK-3 β、C-myc基因及其蛋白的表达,可以促进脑内神经干细胞的分化。3.加减地黄饮子能通过激活WNT信号通路对D-gal致衰老小鼠具有治疗作用。
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