沙眼衣原体感染的HeLa229细胞Bim表达及抑制凋亡的研究

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目的:通过检测沙眼衣原体(D血清型)感染的Hela229细胞中Bim蛋白质的表达水平及凋亡诱导剂作用后的凋亡情况,探讨沙眼衣原体感染对宿主细胞凋亡的影响及可能机制,从而为研究沙眼衣原体持续感染机制、防治沙眼衣原体相关疾病提供实验依据及新的思路。 方法:1.Bim蛋白质表达的检测:采用Western-blot分别检测沙眼衣原体感染和未感染的Hela229细胞Bim蛋白质的表达水平。2.细胞凋亡的检测:凋亡诱导剂etoposide作用Hela229细胞后,经Hoechst33258染色用荧光显微镜观察核浓缩和凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳检测DNA Ladder带;流式细胞仪检测凋亡率。 结果:1.Western-blot结果显示Hela229细胞在未感染及感染沙眼衣原体6小时后可检测到Bim的表达,且两组细胞间Bim表达无明显差异。在沙眼衣原体感染24小时、48小时后均未检测到Bim的表达。2.经etoposide作用6小时后,未感染沙眼衣原体的Hela229细胞用荧光显微镜观察到明显的核浓缩和凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳检测到DNA Ladder带;流式细胞仪检测的凋亡率为90.64%,与未经诱导剂作用的Hela229细胞比较有差异(P<0.05)。而沙眼衣原体感染24小时的Hela229细胞,经凋亡诱导剂作用6小时后未观察到核浓缩和凋亡小体以及DNA Ladder带;流式细胞仪检测的凋亡率为11.50%,与未感染沙眼衣原体的Hela229细胞诱导后的凋亡率比较有统计学意义(P<0.05);而与未经诱导剂作用的沙眼衣原体感染的Hela229细胞比较无统计学意义(P>0.05)。 结论:1.沙眼衣原体感染Hela229细胞后可降低Bim蛋白质的表达。2.沙眼衣原体感染Hela229细胞后能抑制etoposide诱导的细胞凋亡。其抑制作用可能与Bim的表达下调相关。
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