长松萝化学成分与药理活性研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:wanghn019
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本文对长松萝干燥枝状地衣体进行化学成分、药理活性研究。通过对长松萝干燥地衣枝状体进行95%的乙醇提取,用溶剂萃取、柱层析及制备高效液相色谱法分离、纯化获得26个化合物,并进行对核磁共振(NMR,2D-NMR)、质谱(HR-ESI-MS, EI-MS,ES-MS)、紫外、红外等光谱数据分析并结合文献报道,鉴定出24个化合物,包括(22E,24R)-5α,8α-过氧麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(NMJL-1)、麦角甾醇(NMJL-3)等2个甾醇类;1个三萜类木栓酮(NMJL-26);黑茶渍素(NMJL-5)、巴尔巴酸(NMJL-6)、扁枝衣二酸(NMJL-7)、地弗地衣酸(NMJL-18)等4个缩酚类;Isomuronic acid(NMJL-4)、Murotic acid (NMJL-10)、 Lichesterinic acid (NMJL-11)、Neuropogolic acid (NMJL-12)、18R-Hydroxydihydroalloprotolichensterinic acid (NMJL-13)等5个脂肪酸类;苔黑酚(NMJL-8)、瑞藏酸(NMJL-9)、扁枝衣酸乙酯(NMJL-17)、4-O-methylorsellinic acid (NMJL-23)等4个苯酚类;1个黄酮苷类:芹菜素-7-0-β-D-葡萄糖醛酸苷(NMJL-22);正十八烷醇(NMJL-16)和阿拉伯糖醇(NMJL-21)2个醇类;(+)-松萝酸(NMJL-2)、2-(3,3-二(2-(7-乙酰基-4,6-二羟基-3,5-二甲基苯骈呋喃基))-丙烯酰基)-丙二酸二乙酯(NMJL-14)、(4aR,9bS)-2,6-二乙酰基-3,4a,7,9-四羟基-8,9b-二甲基-1-氧代-1,4,4a,9b-四氢二苯骈呋喃酮(NMJL-15)、(Z)-2-乙酰基-5,5-二[2-(7-乙酰基-4,6-二羟基-3,5-二甲基苯骈呋喃基)]-4-羟基-2,4-戊二烯-1-醛(NMJL-24)、4-[3-(7-乙酰基-4,6-羟基-3,5-二甲基-2-氧代-2,3-二氢苯骈呋喃基)]-4-[2-(7-乙酰基-4,6-二羟基-3,5-二甲基苯骈呋喃基)]-3-氧代丁酸乙酯(NMJL-25)等苯骈呋喃类化合物。其中NMJL-14、NMJL-15、NMJL-24、 NMJL-25为新化合物,5个脂肪酸均为仅地衣类中发现的特殊结构,首次从松萝属地衣分离得到,此外NMJL-22也是松萝属首次分离得到的黄酮苷类化合物。对从石油醚相分离得到极性小的白色香味组分进行GC/MS分析,用数据库检索的方法计算其相似度,峰面积归一化法计算其相对含量,共鉴定出17个饱和长链脂肪烷。选用两种与临床应用较一致的人肝癌HepG2细胞和人乳腺癌MCF-7细胞株进行细胞毒性试验,对(+).松萝酸、黑茶渍素、Isomuronic acid、巴尔巴酸、扁枝衣二酸、地费地衣酸、NMJL-14、NMJL-24、NMJL-25等9个成分进行了四甲基偶氮哇盐(MTT)法肿瘤细胞毒性测试,结果MTT处理48h后,与空白对照,9个化合物达到一定浓度时均有极显著(P<0.01)的抑制肿瘤细胞的增值活性,并呈现出随着浓度的升高抑制率提高的趋势。其中化合物NMJL-25对人乳腺癌MCF-7细胞株的半数抑制浓度(ICso)为49.3μmoL/L,已超过松萝酸的(IC50)90.1μmoL/L,除了黑茶渍素以外的其它化合物的活性均与松萝酸的相近。采用ABTS和DPPH两种方法对(+)-松萝酸NMJL-2、Isomuronic acid、黑茶渍素、巴尔巴酸、扁枝衣二酸、苔黑酚、NMJL-15、扁枝衣酸乙酯、地弗地衣酸、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷、NMJL-25等11个化合物进行抗氧化活性测定。结果11种化合物均表现不同程度的抗氧化能力,两种方法测定结果中NMJL-25抗氧化能力特别明显。DPPH自由基半数清除浓度(IC50)为0.01mmoL/L,标准品2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)半数清除浓度(IC50)为0.16mmoL/L; ABTS法测试总抗氧化能力为12.39mM Trolox。本研究通过对传统药材长松萝进行化学成分的提取、分离、鉴定研究,利用光谱法鉴定24个化合物,其中包括4个结构比较新颖的新化合物,并对其人肿瘤细胞毒性及抗氧化活性测定。结果表明,新化合物4-[3-(7-乙酰基-4,6-二羟基-3,5-二甲基-2-氧代-2,3-二氢苯骈呋喃基)]-4-[2-(7-乙酰基-4,6-二羟基-3,5-二甲基苯骈呋喃基)]-3-氧代丁酸乙酯具有较强的抗氧化、肿瘤细胞毒活性。本研究为传统药材长松萝在医药卫生、保健、食品领域中开发利用、药材的质量控制、发现新的活性物质及天然先导化合物提供了科学的依据。
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