论文部分内容阅读
目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor, bFGF)对面神经切断后神经元凋亡及Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白表达的影响。方法:将48只SD大鼠随机分为实验组和单纯生理盐水组,建立面神经切断端端吻合模型,并以两组正常侧做自身对照。实验组腹腔注射给予碱性成纤维细胞生长因子,单纯生理盐水组给予生理盐水。分别在1、7、15、30天经主动脉穿刺灌注固定,以小脑桥延沟为中心,左右水平切取约2 mm的脑组织块,包埋后连续切片。免疫组化染色检测术后1、7、15、30天实验组和单纯生理盐水组面神经元Bcl-2,Bax,Caspase-3蛋白表达;应用原位末端标记(TUNEL)法检测神经元胞体的凋亡;取两组术侧新生面神经长0.5cm,固定、脱水、包埋后超薄切片,行透射电镜观察。结果:(1)面神经元凋亡:实验组和单纯生理盐水组凋亡指数有显著性差异,实验组面神经元凋亡的发生较单纯生理盐水组少(p<0.05)。(2)Bcl-2蛋白表达的改变:实验组Bcl-2蛋白表达逐渐上升,在15天表达形成高峰,单纯生理盐水组Bcl-2蛋白表达逐渐下降,在15天达到最低。实验组Bcl-2蛋白表达和单纯生理盐水组有显著性差异(p<0.05)。(3)Bax蛋白表达的改变:Bax蛋白表达在单纯生理盐水组中随时间的增长不断增加,在15天达到高峰然后下降。实验组Bax蛋白的表达术后快速下降,在15天达到最低点,在30天表达仍低于正常水平。实验组Bax蛋白表达和单纯生理盐水组有显著性差异(p<0.05)。(4)Caspase-3蛋白表达的改变:实验组Caspase-3蛋白表达逐渐下降,而单纯生理盐水组Caspase-3蛋白表达逐渐上升。Caspase-3蛋白表达在实验组和单纯生理盐水组组间比较有显著性差异(p<0.05)。(5)面神经透射电镜观察:实验组再生神经纤维数目、髓鞘厚度明显优于单纯生理盐水组。(6)实验组大鼠损伤侧触须拂动在术后9天出现,术后28天损伤侧触须节律性拂动恢复正常。单纯生理盐水组损伤侧触须拂动出现在术后14天,术后30天触须节律性拂动仍未完全恢复正常。结论:碱性成纤维细胞生长因子可以使受损面神经元Bcl-2蛋白表达增多,Bax及Caspase-3蛋白表达减少,使面神经元凋亡发生减少,这可能是碱性成纤维细胞生长因子对面神经元保护作用的机制之一。